[发明专利]单管扩增同时检测α和β地中海贫血基因试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及基因领域，具体是一种单管扩增同时检测α和β地中海贫血基因试剂盒。

背景技术

地中海贫血（简称地贫）是由于人体基因突变或者缺失而导致α，β-珠蛋白肽链合成速率的不平衡，从而引起的溶血性贫血。地贫为全世界的高发病率遗传病之一，广泛分布于地中海国家及其他疟疾曾经高发地区。我国以长江以南各省发病率高，除广东、广西、海南省等发病率最高外，贵州、云南、四川等也是高发区 。地贫常见的两种类型是α-地贫和β-地贫。

α-地贫是由于常染色体遗传性缺陷，使α珠蛋白基因缺失或功能障碍导致α珠蛋白肽链合成减少或不合成引起的慢性溶血病。α珠蛋白基因位于第16号染色体短臂末端的α珠蛋白基因簇中，该基因包括二个重复的α基因（α₂和α₁）、一个胚胎期类α基因（ζ₂）、三个假基因（Ψζ₁、Ψα₂和Ψα₁）和一个功能未知的基因（θ1），其排列顺序为：5′-ζ₂-Ψζ₁-Ψα₂ -Ψα₁-α₂-α₁-θ₁-3′，全长约30Kb。就一个单倍体而言：地贫可分为三类缺陷：地贫1，缺失两个基因（--/）；地贫2，缺失一个基因（-α/）；非缺失性α基因发生点突变或少数几个碱基的缺失（α^Tα或αα^T）。目前已鉴定的α地贫缺失类型至少36种，东南亚缺失型（--^SEA）、右侧缺失（-α^3.7）和左侧缺失（-α^4.2）是中国人最常见的3种缺失型。非缺失型α地贫点突变类型有30多种，在中国人群中最常见的Constant Spring(CS)、Quong Sze(QS)和Westmead（WS）。

β-地贫是由于血红蛋白的β珠蛋白基因突变导致β珠蛋白肽链缺如(β°)或合成不足(β+)，从而引起的遗传性溶血性贫血病。β珠蛋白基因位于11号染色体短臂（11p15），基因排列顺序为5′-ε-Gγ-Aγ-Ψβ-δ-β-3′，长度约60Kb。绝大多数β地贫是由于点突变所致，少数为基因缺失所致。β⁰珠蛋白生成障碍性贫血，突变导致β链的合成完全受抑制，无β链生成；β⁺珠蛋白生成障碍性贫血，突变导致β链的合成部分受抑制，有少量β链合成；非典型β珠蛋白生成障碍性贫血，分子缺陷位于β珠蛋白基因启动区或位点控制区（LCR），导致β珠蛋白表达受影响。全世界已报道170种左右β珠蛋白基因的突变型，导致中国人群β地贫发生的突变基因有23种。最主要的6种CD41-42(-4bp)，IVS-II-654(C-T)，CD17(A-T)，CD71-72(+A)，-28(A-G)以及CD26(G-A)，占中国人β地贫突变基因总数的80%以上，而且这些不同的β地贫基因在不同地区的发生率也有所不同。

该病在我国的患者及基因携带者大约有3000万，对我国的人口素质及国民健康造成了极大威胁。据前些年调研，仅在广西α-地贫基因携带率高达15％，β-地贫基因携带率也达到5％，全广西地中海贫血基因携带者约900多万，广东地中海贫血基因携带者也是近千万。按照该病的遗传规律，如果夫妻二人均为相同类型地中海基因携带者，则有25％的几率生出重型或中间型地中海贫血患儿，也就是说，每年全国有成千上万的重型或中间型地中海贫血患儿出生。

地中海贫血症的临床表型多样，可以从正常到需要反复输血，甚至危及生命，导致患者在未成年前夭折甚至死胎。该病在我国南方的高发病率，对社会和家庭产生巨大的精神和经济压力。然而目前该病尚缺乏理想的治疗方法，筛查是降低致病基因在人群中传递及降低患病率最有效的方法。研究和检测地中海贫血是一项很有意义的工作，它对开展地贫人群筛查，遗传咨询和产前诊断有重要的知道意义。对提高人口素质和促进整个社会的经济发展有重要的意义。