[发明专利]一种XL-2人肺癌高转移细胞系及用途

说明书

技术领域

本发明涉及细胞生物学领域，特别涉及一种人肺癌高转移细胞系及用途。

背景技术

肿瘤转移是一个多阶段、多步骤、多因素、多基因相互作用极其复杂的过程，自癌细胞从瘤母体脱离到转移灶形成要经过黏附与解黏附、蛋白酶水解、运动等复杂过程和机制。在恶性肿瘤患者体内，进入淋巴管或血管的瘤细胞可以有很多，但是只有某些瘤细胞亚群得以优势生长，获得转移表型，这些具有高转移潜能的瘤细胞才易发生转移。动物实验也证明：将T241肉瘤细胞移植于C₅₇BL/6小鼠后，24小时在血液中就可查见活的瘤细胞，但到第7天后方出现转移；将放射性标记的肿瘤细胞注入动物血管中，进入血循环24小时后，能够存活的瘤细胞仅1％，而最后抵达某一部分产生继发灶的不到0.1％。

目前，尽管国内外由学者采用筛选的方法成功建立了高转移模型，例如：Krasagakis等曾经从皮肤神经经内分泌细胞癌的淋巴结转移灶中建立了癌细胞系。Lee等从前列腺癌硬脑膜转移灶中建立了癌细胞系。Seki等从人肝癌淋巴结转移灶中建立了一个细胞系。但是，目前少见成功构建理想的人肺癌体内移植转移模型的报道。因此本领域还需要进一步研究开发出人肺癌高转移模型及细胞系。

另外目前经过连续的体外人工培养传代，很多肿瘤细胞已经不能维持其最原始的生物学特性。因此，使用这种肿瘤细胞建立的转移模型其临床预测能力较低。

发明内容

本发明的目的在于提供一株人肺癌XL-2高转移细胞系。

本发明另一目的在于提供该人肺癌XL-2高转移细胞系的用途。

在本发明的第一方面，提供一种人肺癌XL-2高转移细胞系，简称XL-2sci，其是以常规肺癌细胞XL-2细胞，经动物体内循环筛选获得；所述人肺癌细胞XL-2细胞在中国典型培养物保藏中心保藏，保藏号为CCTCCNOC201282，中国典型培养物保藏中心地址：中国.武汉.武汉大学，保藏日期2012年6月19日。

在本发明的一个优选实施例中，所述人肺癌XL-2高转移细胞系的染色体除了具有XL-2细胞中出现的两个染色体异位之外还具有另一个异位：der(9)(9pter→p11::1q11→qter)；除此之外，XL-2高转移细胞中还有一个marker染色体。

在本发明的一个优选实施例中，所述人肺癌XL-2高转移细胞系的肺转移率90％。

在本发明的第二方面，提供所述人肺癌XL-2高转移细胞系的用途，用于筛选肺癌转移相关基因。

在本发明的第三方面，提供一种筛选潜在的肺癌转移相关基因的方法，所述方法包括如下步骤：将所述的人肺癌XL-2高转移细胞系与人肺癌细胞XL-2中表达的基因比较，选出所述的人肺癌XL-2高转移细胞系中在统计学上表达上调的基因，该基因为潜在的肺癌转移相关基因。

在另一优选例中，该方法还包括：在所获得的潜在的肺癌转移相关基因进行进一步的细胞试验和/或动物试验，以选出对于肺癌的而转移起确切作用的基因。

在本发明的第四方面，提供所述的人肺癌XL-2高转移细胞系的用途，用于筛选抗肿瘤转移药物。

本发明的其它方面由于本文的公开内容，对本领域的技术人员而言是显而易见的。

附图说明

图1为XL-2细胞上皮特性及染色体核型分析示意图。

图2为XL-2细胞II型肺泡起源及肺腺癌特点示意图。

图3为第一、三、五轮筛选获得的人肺癌XL-2高转移细胞系体外迁移、侵袭能力比较示意图。

图4为XL-2高转移细胞染色体核型分析示意图。

图5为人肺癌XL-2细胞与人肺癌XL-2高转移细胞系体内转移能力比较示意图。

图6为人肺癌XL-2细胞与人肺癌XL-2高转移细胞系之间侵袭、迁移、增殖能力的比较示意图。

图7为克隆形成实验检测人肺癌XL-2细胞与人肺癌XL-2高转移细胞系之间单个细胞增殖能力示意图。

具体实施方式

本发明人经过长期的研究和反复的筛选，找到一种肺癌转移率高且恶性程度高的人肺癌XL-2高转移细胞系，所述的人肺癌XL-2高转移细胞系是一种理想的研究肿瘤转移的模型。基于此完成了本发明。人肺癌高转移细胞肿瘤细胞存在一定的异质性，它们之间的转移潜能存在差异。

本发明进行反复的筛选，旨在找到转移潜能高的人肺癌XL-2高转移细胞系。