[发明专利]固定有抗原的免疫荧光载片的制备方法和由该方法制备的免疫荧光载片

权利要求书

1.制备固定有抗原的免疫荧光载片的方法，所述方法包括：将C反应蛋白固定在载片上制备蛋白芯片；用荧光纳米颗粒标记能够特异结合C反应蛋白的抗体；将由标本获得的靶蛋白与荧光标记抗体混合，使混合液与载片上固定的抗原反应，以及通过利用荧光显微镜测量荧光强度或荧光颗粒的数量进行分析，

其中用荧光纳米颗粒对抗体进行的标记包括：

将链霉亲和素修饰的荧光二氧化硅纳米颗粒溶液超声处理10-30分钟；

取所得溶液200-600μl加入1-3ml 0.05-0.25mg/ml生物素化抗体溶液中，室温反应1-3小时，期间以30分钟的间隔于30-200rpm的低速进行搅拌，每次搅拌2-7分钟；

反应溶液在3-10℃的温度下以7000-17000rpm的速率离心20-40分钟，弃去上清液，收集沉淀；

用30-70mM磷酸盐缓冲液(pH 6.5-7.8)将沉淀物洗一到五次，每次洗涤后，在和以上描述的相同的条件下离心，获取沉淀物；和

将沉淀物重悬于0.4-1.2ml 30-70mM磷酸盐缓冲液(pH 6.5-7.8)中。

2.利用权利要求1所述方法制备的免疫荧光载片，其中所述免疫荧光载片是用3-氨丙基三甲氧基硅烷或3-巯基丙基三甲氧基硅烷-N-γ马来酰亚胺基丁酰氧基琥珀酰亚胺酯进行表面修饰过的，并且包含1-100μl 0.01-0.5mg/ml C反应蛋白。

3.利用权利要求2所述的免疫荧光载片测量标本中C反应蛋白的方法。