[发明专利]京单38三系配套杂交种制种方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种京单38三系配套杂交种制种方法。

背景技术

强优势杂交种的选育和推广是提高玉米产量的重要途径。利用常规的制种方法配制杂交种需要对母本进行人工去雄，不仅耗费大量的劳动力，增加种子生产成本，且存在由于去雄不及时、不彻底影响种子质量的潜在风险。利用雄性不育系制种是保证种子纯度提高玉米产量的一种有效方法。

早在上世纪五六十年代，国内外就开始了对玉米不育化制种的研究。细胞质雄性不育由于容易实现不育系、保持系和恢复系的配套，是玉米育种中利用的主要类型。细胞质雄性不育系可划分为T、S和C型。60年代初，T型不育系引入我国。由于对玉米小斑病“T小种”专化性侵染，T型不育系的应用受到严重限制。70年代，我国育种工作者从国外引进C型、S型不育系。C型不育系虽然不育性较稳定、彻底，但其恢复系通常需要重新转育，周期长且步骤繁琐，导致该型不育系在实践中难以普及应用。S型不育系是3种类型中最大的一个组，已有研究证明昌7-2等黄改系材料是其天然强恢复系。但S型不育系的育性因基因型背景的不同而有较大差异，在特定的遗传背景下育性高度稳定。国内优良玉米杂交种的父本多属黄改种质，因此充分利用S型不育系可以节省恢复系的转育工作，是实现快速不育化制种研究和应用的有效途径。

实现玉米细胞质雄性不育化制种的关键是不育系、保持系和恢复系的选育。选育不育系最常用的方法是回交转育法，即用稳定的不育系作非轮回亲本，选择优良自交系作轮回亲本，进行多代回交，育成不育性稳定的优良不育自交系，而原轮回亲本便是该不育系的保持系。但仅仅利用传统的回交转育方法，一般需回交5-6代，转育周期较长，延缓了不育化制种技术在玉米杂交种上的应用。利用回交转育方法进行恢复系的选育比不育系更为复杂，在回交的同时要进行测交，以测交结果作为恢复系的选择标准；或在回交转育中利用不育细胞质提供育性的指标性状。由于选育过程相对繁琐，在恢复系尚未育成或只有部分恢复性的情况下，须将不育化的杂交种子与正常杂交种种子按适当比例掺合使用，这就给种子生产在技术和管理上提出了更高的要求。因此，如何加快不育系的选育速度、简化恢复系的选育过程，是目前雄性不育化制种技术亟需解决的问题。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种杂交制种的方法。

本发明提供的方法，包括如下步骤：以玉米不育系SCH3为不育系，玉米自交系CH3为保持系，玉米自交系京2416为恢复系，进行三系配套制种，得到杂交种京单38。

上述方法中，所述不育系SCH3为按照包括如下步骤的方法转育：

a)以玉米不育系S京724做母本，CH3做父本杂交，得到雄性不育杂交子代F₁；

b)以所述雄性不育杂交子代F₁为母本、与CH3回交，得到雄性不育BC₁代群体；

c)以雄性不育BC₁代单株为母本、与CH3继续回交，得到雄性不育BC₂代群体；

d)以雄性不育BC₂代单株为母本、与CH3继续回交，得到不育系SCH3。

上述方法中，在步骤b)和c)之间，还包括BC₁分子鉴定的步骤；

所述BC₁分子鉴定为用SSR核心引物bnlg2291k4、bnlg2305k4、umc1545y2、umc1125y3、bnlg240k1、phi065k9、phi96100y1、umc2115k3、umc2160k3、umc1936k4、phi041y6分别对所述雄性不育BC₁代群体单株进行PCR扩增实现分子鉴定，选取与CH3遗传相似度在96-97.5％的雄性不育BC₁代单株；

遗传相似度计算公式：[1-差异等位基因数/(比较总位点数×2)]×100％

在步骤c)和d)之间，还包括BC₂分子鉴定的步骤；

所述BC₂分子鉴定为用引物A对所述雄性不育BC₂代单株进行PCR扩增，选择扩增图谱与用同样引物对所述CH3进行PCR扩增得到的图谱相同的BC₂代单株；

所述引物A为BC₂代单株对应的母本BC₁代与CH3相比扩增带型不同的SSR引物；