[发明专利]基于纳米铂模拟过氧化物酶的汞离子检测方法及其试剂盒

权利要求书

1.一种基于纳米铂模拟过氧化物酶的汞离子比色检测方法，其特征是纳米铂与汞离子的特异性相互作用后其模拟过氧化物酶活性的抑制变化，通过纳米铂催化过氧化氢氧化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐显色，根据显色体系溶液颜色判断或紫外吸收光谱特征的变化，来测定汞离子浓度，所述纳米铂由以下步骤制成的：将1 ml 浓度为16 mmol/L 氯铂酸水溶液与1 ml 浓度为40 mmol/L的柠檬酸三钠混合，并用38 ml的双蒸水稀释，暗处搅拌30分钟，随后加入0.2 ml浓度为50 mmol/L的硼氢化钠水溶液，加入时间控制在2分钟内，反应溶液颜色从浅黄色变成棕黄色，暗处继续搅拌1小时；能根据紫外吸收光谱的最大吸收波长652 nm处的吸收值以判断汞离子的浓度。

2.根据权利要求1所述的基于纳米铂模拟过氧化物酶的汞离子比色检测方法，其特征是将纳米铂溶液用双蒸水稀释50倍得浓度为1.56 mg/L的纳米铂溶液，在0.1 ml浓度为1.56 mg/L的纳米铂溶液中，加入0.4 ml不同浓度的汞离子样品溶液，混合后在室温放置2分钟，在混合溶液中加入2.3 ml的双蒸水、1 ml浓度为2 mol/L的过氧化氢、0.2 ml浓度为16 mmol/L的3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐，混合后45℃水浴10分钟，目视观察溶液颜色的变化或测定最大吸收波长652 nm处的吸收值，当不含汞离子时，溶液显深蓝色，随着汞离子浓度的增大，体系溶液颜色逐渐变浅，肉眼观察的检测限为1.5 nmol/L，随着汞离子浓度的增大，在最大吸收波长652 nm处的吸收值逐渐减小，吸收光谱逐渐下降；根据空白吸收值A₀与含有汞离子吸收值A的差值（A₀-A）绘制标准曲线，在0.01~4 nmol/L 汞离子浓度范围内A₀-A与汞离子浓度呈线性关系，检测限为8.5 pmol/L。

3.一种基于纳米铂模拟过氧化物酶快速测定水样中汞离子的方法，其特征是包括如下步骤：在0.1 ml浓度为1.56 mg/L的纳米铂溶液中，加入0.4 ml待测水样，混合后在室温放置2分钟，在混合溶液中加入2.3 ml的双蒸水、1 ml浓度为2 mol/L的过氧化氢、0.2 ml浓度为16 mmol/L的3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐，混合后45℃水浴10分钟，目视观察溶液颜色的变化或测定溶液最大吸收波长652 nm处的吸收值，根据溶液颜色判断待测水样中的汞离子含量或根据空白吸收值A₀与含有汞离子吸收值A的差值（A₀-A）定量计算待测水样中的汞离子含量；所使用的纳米铂的制备方法为：将1 ml 浓度为16 mmol/L 氯铂酸水溶液与1 ml 浓度为40 mmol/L的柠檬酸三钠混合，并用38 ml的双蒸水稀释，暗处搅拌30分钟，随后加入0.2 ml浓度为50 mmol/L的硼氢化钠水溶液，加入时间控制在2分钟内，反应溶液颜色从浅黄色变成棕黄色，暗处继续搅拌1小时。

4.一种基于纳米铂模拟过氧化物酶的汞离子检测试剂盒，其特征是试剂盒中包括柠檬酸修饰的纳米铂的a液，显色底物过氧化氢和3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐的b液；所述a液包括制备后稀释50倍的纳米铂溶液，其浓度为1.56 mg/L；所述b液包括过氧化氢及3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐，过氧化氢浓度为0.571 mol/L，3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐浓度为0.914 mmol/L，所使用的柠檬酸修饰的纳米铂的制备方法为：将1 ml 浓度为16 mmol/L 氯铂酸水溶液与1 ml 浓度为40 mmol/L的柠檬酸三钠混合，并用38 ml的双蒸水稀释，暗处搅拌30分钟，随后加入0.2 ml浓度为50 mmol/L的硼氢化钠水溶液，加入时间控制在2分钟内，反应溶液颜色从浅黄色变成棕黄色，暗处继续搅拌1小时；

将0.4 ml待检测的样品溶液中加入0.1 ml的a液，混合后在室温放置2分钟，在混合溶液中加入3.5 ml的b液，混合后45℃水浴10分钟，目视观察溶液颜色的变化或测定最大吸收波长652 nm处的吸收值；根据溶液颜色目视判断或通过吸光度测定的空白吸收值A₀与含有汞离子吸收值A的差值（A₀-A）绘制的标准曲线进行定量；所述目视观察的检测限为1.5 nmol/L，所述吸光度测定的检测限为8.5 pmol/L。