[发明专利]一种具有抗污染能力的细胞培养基在审
| 申请号: | 201410483590.8 | 申请日: | 2014-09-22 |
| 公开(公告)号: | CN104195095A | 公开(公告)日: | 2014-12-10 |
| 发明(设计)人: | 高林;李华春;何于雯;姚俊;廖德芳;朱建波 | 申请(专利权)人: | 云南省畜牧兽医科学院 |
| 主分类号: | C12N5/00 | 分类号: | C12N5/00 |
| 代理公司: | 无 | 代理人: | 无 |
| 地址: | 650224 *** | 国省代码: | 云南;53 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 具有 污染 能力 细胞 培养基 | ||
技术领域
本发明涉及一种具有抗污染能力的细胞培养基,属于生物科学技术领域。
背景技术
目前市售的细胞培养基分为两种,一种是液体培养基,另一种是干粉培养基。前者是无菌包装的,但其本身并没有抗污染能力;后者虽不是无菌包装,但配好后,必须过滤除菌,或者高压灭菌,其本身也不具有抗污染能力。为了不出现污染,使用者一般会在使用时添加抗菌剂来预防污染,或者尽可能地小心地操作,避免带进污染。这样一来,将增加使用者的操作步骤,或者增加使用者的操作难度。因此,多事使用者都希望能拥有一种能长期保持抗污染能力的细胞培养基。
发明内容
本发明的目的就是提供一种具有抗污染能力的细胞培养基,用于预防细胞培养中常见的污染。
本发明通过以下技术方案实现:1、在每升液体培养基中添加10-20毫克的乙基环丙沙星;2、在干粉培养基中,也是按每能配制1升液体培养基的干粉培养基中添加10-20毫克的乙基环丙沙星。
本发明与现有技术相比具有以下优点和效果:
1、本发明的抗污染能力保持时间很长,远超过培养基自身的使用时限。也就是说,当培养基失去培养细胞的能力时,它仍然具有抗污染能力。所以使用本发明只需考虑其培养功能是否失效,不用考虑抗菌能力是否失效;
2、本发明可以预防细胞培养中常见的细菌和支原体污染,而商品培养基没有任何抗菌功能;
3、本发明减少了使用者的操作步骤。虽然使用者也可以在使用时添加抗菌剂,但毕竟增加了操作步骤和带进污染的风险,并且常用的抗菌剂,即使现用现加,其抗污染能力是只能维持当下那几天,时间长了还是不行。
本发明的使用效果见下表:
表一、无菌和有菌条件下是否使用本发明24小时后的结果对照表
表中“-”表示污染阴性,“+”表示污染阳性。
表一所对应的实验为用12孔细胞培养板所做的实验,其中所有有菌的处理,细菌的接种量都是相等的,并且在实验中,本发明的培养基为已经过期两个月的液体培养基。通过表一可以看出,使用本发明,即使过期培养基里染上少量细菌,其抗污染能力依然出色。
具体实施方式
实施例1
配制1升的MEM(Minimum Essential Medium,最低营养需求)干粉培养基:按以下配方配制MEM粉末培养基,配好后密封,置4℃避光保存。
实施例2
配制1升1倍的MEM:将实施例1的配方产品加入一个1升的三角瓶内,加入900毫升超纯水,混匀,让所有成份完全溶解。用1M的NaOH和1M的HCl将pH值调到7.0,再用超纯水将体积定容为1升。然后用0.22微米的滤膜过滤除菌。最后分装和密封,置4℃避光保存。
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