[发明专利]一种分离枳实中多甲氧基黄酮、橙皮苷和辛弗林的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种中药有效成分的提取方法，尤其涉及一种分离枳实中多甲氧基黄酮、橙皮苷和辛弗林的方法，属于中药加工领域。

背景技术

枳实为芸香料酸橙及其栽培变种甜橙的干燥幼果，其性苦、辛、酸、温，归脾，胃经，具有破气消积，化痰散痞之功效。枳实中主要含有黄铜类、挥发油类以及少量的生物碱。黄酮类物质不仅具有抗菌、抗病毒、抗发炎、以及血管舒张作用，还具有抑制脂质过氧化作用，血小板凝集以及大量酶的活性，而且能改善毛细血管的渗透性以及脆性；其中的橙皮苷具有抗氧化、降血脂、抗动脉粥样硬化等广泛的生物活性，是重要的医药原料；也是调味剂、抗氧剂、色素和保健品等工业原料，具有很高的利用价值；黄酮中的多甲氧基黄酮具有抗病毒、抗菌、抗肿瘤、抗氧化、抗心脑血管疾病等药理作用，它的合成具有巨大的实用价值；另外，生物碱中的辛弗林已收载于北欧三国药典和德国药典，为肾上腺素ɑ-受体兴奋剂，对心脏-受体有一定的兴奋作用，是21世纪天然兴奋剂，无任何副作用和阳性反应，广泛用于医药、食品、饮料等保健行业，随着化学合成药物的禁用，辛弗林的需求量和价值将会倍增。

随着各种天然有效成分的利用价值逐年升高，从植物中提取这些有效成分也愈显重要，但一般都是为获得单一活性成分而开发和设计的，虽然从生产操作上提高了生产效率，但由于各种活性成分之间性质的差异，导致了这些工艺都只能生产单一的一种活性成分产品，其他活性成分大部分在处理过程中随着废液流失，少部分被当成废渣处理，从而无法综合利用枳实中的多种活性成分，导致了中药材资源的利用效率不足。

国家知识产权局于2011年6月29日公开了一件公告号为CN102106918A，名称为“一种同时制备枳实挥发油、总黄酮和总生物碱的方法”的发明专利，该专利主要利用水蒸气蒸馏、特定型号的离子交换树脂和大孔吸附树脂联用的方法，同时提取分离了枳实中挥发油、总黄酮和总生物碱，但采用了三种方法，相当于三种物质分开提取，其工艺复杂，效率低，成本高，并且总黄酮仍是一个混合物，未将其中具有重大经济价值的多甲氧基黄酮和橙皮苷单独分离出来。

发明内容

本发明旨在解决现有技术中枳实中有效成分的同时提取需采用多种方法，工艺复杂，效率低，成本高以及分离出的黄酮类物质仍是混合物，不能将多甲氧基黄酮和橙皮苷单独分离出来的问题，提出一种采用大孔吸附树脂分步提取多甲氧基黄酮、橙皮苷和辛弗林的方法，该方法简单、效率高并可将黄酮中的多甲氧基黄酮和橙皮苷分离。

本发明的技术方案如下：

一种分离枳实中多甲氧基黄酮、橙皮苷和辛弗林的方法，其特征在于：包括以下步骤：

a.大孔吸附树脂预处理

将大孔吸附树脂用浓度为90～95%的乙醇浸泡20～24h后，用水进行清洗，再用浓度为5～6%的盐酸浸泡5～8 h，用水洗至中性，然后用5～7%氢氧化钠溶液浸泡5～8h，用水洗至中性后，湿法装注，再用乙醇对树脂进行清洗至洗出液澄清，用水清洗后备用；

b.枳实预处理

将烘干后的枳实粉碎后，加入与枳实粉重量体积比为1：9～11，浓度为60～80%的乙醇，回流提取2～4次，每次5～7h，过滤后将多次过滤液合并，浓缩至浓度为30～35%，调节PH值为4～5后备用；

c.多甲氧基黄酮的提取

将步骤b中得到的溶液通过步骤a中备好的大孔吸附树脂柱进行上样，其中，上样时溶液的流速为10～20ml/h，溶液与树脂的体积比为2:1，吸附流速为0.5～0.8BV/h，树脂柱径高比为1:10，上样后用树脂体积比为2～3:1的乙醇作洗脱剂进行洗脱，并将洗脱液浓缩后，结晶，即得到多甲氧基黄酮晶体；                                                                                               

d.橙皮苷的提取

以90%的乙醇作洗脱剂继续对树脂柱进行洗脱，乙醇与树脂体积比为2～3:1,浓缩洗脱液至膏状后，用碳酸氢钠溶液溶解浸膏，再用冰醋酸将溶液PH值调节至4.5，静置，沉淀，过滤，去除上层清液后，干燥得到橙皮苷； 

e. 辛弗林的提取

用PH值为10～11的氨水溶液作洗脱剂，继续冲洗上述树脂柱，氨水与树脂的体积比为2:1，浓缩洗脱液，干燥后得到辛弗林。

步骤a中，所述的湿法装注的具体步骤为：将树脂与水以体积比为2～3的比例，倒入树脂柱中。

步骤a中，所述的大孔吸附树脂型号为D-101。

步骤a中，所述的水为去离子水。