[发明专利]一种云芝中多糖的提取方法

权利要求书

1.   一种云芝中多糖的提取方法，其特征于，包括以下步骤：

（1）样品预处理：取云芝3-5g冷冻干燥至恒重，粉碎过筛，取筛下样品粉末备用；

（2）菌种培养活化：取步骤（1）中制得的样品粉末置入斜面培养基中进行培养，得到活化的菌株；

（3）摇瓶发酵培养：取步骤（2）中活化的菌株置入发酵瓶中进行摇瓶发酵培养，得菌株发酵液；

（4）多糖提取：将步骤（3）中制得的菌株发酵液加等量的蒸馏水进一步溶解稀释，置入微波炉中提取，反复提取多次，提取结束后，离心，取上清液旋转蒸发至原上清液体积的1/4，加入无水乙醇，超声混匀，置于4℃冰箱过液，离心，弃上清，取沉淀干燥至恒重即为云芝多糖。

2.根据权利要求1所述的一种云芝中多糖的提取方法，其特征于，步骤（1）中所述的粉碎过筛为过40-80目筛。

3.根据权利要求1所述的一种云芝中多糖的提取方法，其特征于，步骤（2）中所述的斜面培养基的组分为：马铃薯15-25%，葡萄糖1-3%，磷酸二氢钾0.1-0.5%，硫酸镁水合物0.1-0.3%，琼脂1-3%。

4.根据权利要求1所述的一种云芝中多糖的提取方法，其特征于，步骤（3）中所述的摇瓶发酵培养基的组分为：马铃薯汁30-50%，葡萄糖1-3%,硫酸镁水合物0.1-0.3%，硫酸钠0.03-0.08%，磷酸二氢钾0.1-0.5%。

5.根据权利要求1所述的一种云芝中多糖的提取方法，其特征于，步骤（2）中所述的斜面培养基及步骤（3）中所述的摇瓶种子培养基均为在121℃条件下湿热灭菌30-40min的培养基。

6.根据权利要求1所述的一种云芝中多糖的提取方法，其特征于，步骤（2）中所述的培养条件为：培养温度25-28℃，培养时间3-5d。

7.根据权利要求1所述的一种云芝中多糖的提取方法，其特征于，步骤（3）中所述的培养条件为：摇床速度200-220r/min，培养温度25-28℃，培养时间3-5d。

8.根据权利要求1所述的一种云芝中多糖的提取方法，其特征在于，步骤（4）中所述的微波提取的条件为：提取时间20-30s，提取功率为260-265W，提取温度为55-60℃；所述的微波提取采用间歇提取，反复提取次数为3-5次。

9.根据权利要求1所述的一种云芝中多糖的提取方法，其特征于，步骤（4）中所述的离心的速度为13000-150000r/min,离心时间为5-10min。

10.根据权利要求1所述的一种云芝中多糖的提取方法，其特征于，步骤（4）中所述的超声混匀时间为15-30min。