[发明专利]产生甲硫氨酸而不产生N-酰基甲硫氨酸在审
| 申请号： | 201410478758.6 | 申请日： | 2009-08-21 |
| 公开（公告）号： | CN104293845A | 公开（公告）日： | 2015-01-21 |
| 发明（设计）人： | 格维内尔.贝斯特尔-科雷;菲利普.索凯尔;雷纳.菲格 | 申请（专利权）人： | 代谢探索者公司 |
| 主分类号： | C12P13/12 | 分类号： | C12P13/12;C12N1/20;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京坤瑞律师事务所 11494 | 代理人： | 封新琴 |
| 地址： | 法国圣*** | 国省代码： | 法国;FR |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 产生 甲硫氨酸 | ||
1.一种在发酵方法中产生甲硫氨酸或其前体的方法，包括下述步骤：
-在包含碳源、硫源和氮源的适当培养基中培养修饰的大肠杆菌菌株，和
-从培养基回收甲硫氨酸和/或其衍生物，
其中通过减弱所述微生物中由基因yncA编码的甲硫氨酸转酰基酶的表达，使得N-乙酰甲硫氨酸和N-丙酰甲硫氨酸的累积相对于未经修饰的大肠杆菌菌株减少。
2.权利要求1的方法，其中由选自下组的基因编码的其他甲硫氨酸转酰基酶的表达被减弱：argA、yjdJ、yfaP、yedL、yjhQ及其组合。
3.权利要求1的方法，其中N-乙酰甲硫氨酸和N-丙酰甲硫氨酸的产生还通过将选自下组的至少一种天然或异源的N-酰基-L-氨基酸酰胺水解酶在大肠杆菌菌株中表达来减少：
a.曲霉属(Aspergillus)N-酰基氨基酸酰基酶
b.猪N-酰基氨基酸酰基酶
c.由argE基因编码的乙酰鸟氨酸脱乙酰酶。
4.权利要求1的方法，其中N-乙酰甲硫氨酸和N-丙酰甲硫氨酸的产生还通过调适选自下组的培养条件来减少：pH，加氧和/或温度，或通过将N-酰基氨基酸酰基酶添加入培养基来减少。
5.权利要求1的方法，其中N-乙酰甲硫氨酸和N-丙酰甲硫氨酸的产生通过下述来减少：
a)减弱编码甲硫氨酸N-酰基转移酶的基因yncA的表达，和
b)表达至少一种天然或异源的N-酰基甲硫氨酸脱酰基酶，选自：
a.曲霉属N-酰基氨基酸酰基酶
b.猪N-酰基氨基酸酰基酶
c.由argE基因编码的乙酰鸟氨酸脱乙酰酶。
6.权利要求1的方法，其中N-乙酰甲硫氨酸和N-丙酰甲硫氨酸产生通过如下来减少：减弱编码甲硫氨酸N-酰基转移酶的基因yncA的表达，并且调适选自pH，加氧和/或温度的工艺条件，或将氨基酸酰基酶添加入培养基。
7.权利要求1的方法，其中N-乙酰甲硫氨酸和N-丙酰甲硫氨酸产生通过如下来减少：
-减弱编码甲硫氨酸N-酰基转移酶的基因yncA的表达，和
-表达至少一种天然或异源的N-酰基甲硫氨酸酰基酶，选自：
a.曲霉属N-酰基氨基酸酰基酶
b.猪N-酰基氨基酸酰基酶
c.由argE基因编码的乙酰鸟氨酸脱乙酰酶，和
-调适选自pH，加氧和/或温度的培养条件，或将氨基酸酰基酶添加入培养基。
8.权利要求1的方法，其中使所述大肠杆菌菌株对于磷酸盐和/或钾受限制或饥饿。
9.一种大肠杆菌菌株，包含权利要求1中所述的由基因yncA编码的甲硫氨酸转酰基酶的表达的减弱。
10.一种大肠杆菌菌株，包含由基因yncA编码的甲硫氨酸转酰基酶的表达的减弱和至少一种甲硫氨酸特异性氨基酰基酶的表达的增强。
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