[发明专利]一种微生物可诱导基因表达调控系统有效
申请号: | 201410476748.9 | 申请日: | 2014-09-18 |
公开(公告)号: | CN105483128B | 公开(公告)日: | 2018-07-27 |
发明(设计)人: | 崔球;张杰;刘亚君;崔古贞 | 申请(专利权)人: | 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/63 |
代理公司: | 青岛合创知识产权代理事务所(普通合伙) 37264 | 代理人: | 傅培 |
地址: | 266101 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 微生物 诱导 基因 表达 调控 系统 | ||
1.一种L-阿拉伯糖诱导的启动子,其特征在于:该启动子的核苷酸序列是序列表SEQID NO:2所示的序列。
2.含有权利要求1中所述启动子的重组载体、表达盒或重组菌。
3.一种微生物的可诱导基因表达调控体系,其特征在于:包括诱导剂L-阿拉伯糖、序列表SEQ ID NO:1的反馈抑制蛋白AraR和具有反馈抑制蛋白AraR结合位点的启动子Para;所述启动子Para的序列表为SEQ ID NO:2。
4.根据权利要求3所述的一种微生物的可诱导基因表达调控体系,其特征在于:所述微生物为梭菌属。
5.根据权利要求4所述的一种微生物的可诱导基因表达调控体系,其特征在于:所述梭菌属包括解纤维梭菌、丙酮丁醇梭菌、热纤梭菌或粪堆梭菌。
6.一种微生物的反向基因筛选体系,其特征在于:包括诱导剂L-阿拉伯糖、序列表SEQID NO:1的反馈抑制蛋白AraR、具有反馈抑制蛋白结合位点的启动子元件Para以及毒性基因;所述启动子Para的序列表为SEQ ID NO:2;所述毒性基因为mazF基因、pyrF基因、hpt基因、tdk基因、codA基因、sacB基因和galK基因中的一个或多个。
7.根据权利要求6所述的一种微生物的反向基因筛选体系,其特征在于:所述微生物为梭菌属。
8.根据权利要求7所述的一种微生物的反向基因筛选体系,其特征在于:所述梭菌属包括解纤维梭菌、丙酮丁醇梭菌、热纤梭菌或粪堆梭菌。
9.一种降低基于二类内含子的基因靶向操作技术的脱靶率的方法,其特征在于:以L-阿拉伯糖为诱导剂,利用反馈抑制蛋白AraR和具有反馈抑制蛋白结合位点的启动子元件Para,对二类内含子元件进行可控诱导表达。
10.根据权利要求9所述的一种降低基于二类内含子的基因靶向操作技术的脱靶率的方法,其特征在于:所述基于二类内含子靶向操作技术包括Clostron、Targetron或Thermotargetron。
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