[发明专利]一种聚磷菌培养基及其制备方法在审
| 申请号: | 201410476644.8 | 申请日: | 2014-09-17 |
| 公开(公告)号: | CN104212750A | 公开(公告)日: | 2014-12-17 |
| 发明(设计)人: | 张文艺;陈晶;周新程;冯国勇;胡林潮;姚立荣 | 申请(专利权)人: | 常州大学 |
| 主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12R1/38 |
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| 地址: | 213164 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 聚磷菌 培养基 及其 制备 方法 | ||
技术领域
本发明属于污水处理技术领域,具体涉及一种聚磷菌培养基及其制备方法。
背景技术
地表水环境污染问题之一是水体富营养化,藻类大量繁殖引发淡水区域“水华”和海域的“赤潮”现象。生态学中的“利比希(Liebig)最小因子定律”表明,水体中较高浓度的磷含量是引发地表水体富营养化的主要环境因素,当总磷浓度超过0.1mg/L(如果磷是限制因素)时,藻类会过量生长,引发江河、湖塘、近海的富营养化。
国内外的污水污水处理厂多采用生物法即生物强化除磷工艺,而聚磷菌是生物强化除磷工艺的主要功能菌群。聚磷菌(poly-phosphate accumulating organisms,PAOs)是一类以氧为电子受体聚磷的菌群,在厌氧环境中PAOs释放体内的多聚磷酸盐(Poly-P)获得能量吸收水体中的挥发性脂肪酸,将其储存为聚羟基脂肪酸酯(PHA);在好氧环境中再消耗PHA,以氧为电子受体超量吸收水中的磷,并在菌株体内再次合成Poly-P。利用聚磷菌进行生物除磷,既节约了投加化学药剂除磷所增加的成本,又可以减少因投加化学药剂所造成的化学污泥。
城市污水处理厂的活性污泥中一般均存有聚磷菌,可利用适当的培养基对聚磷菌进行培养、筛选与分离。牛肉膏蛋白胨培养基作为微生物培养基质,因其对菌种培养具有普遍适用性,所以在菌种培养和筛选被广泛使用。但牛肉膏蛋白胨培养基成分中的牛肉膏和蛋白胨的保质期短,而且保存条件较为苛刻,一旦没有控制好保存条件致使培养基变质就会造成菌种的丢失,即使及时的转接菌种至新鲜的牛肉膏蛋白胨培养基上,但会由于菌株传代次数过多而降低菌株内在性能,这些都限制了聚磷菌的培养、分离以及应用。近年来国内外对聚磷微生物研究较为活跃,中国发明专利(申请公告号CN 103540546A)从鱼塘底泥分离出一株高效的聚磷菌GPA1(Pseudomonas sp.)在处理温度为30℃,pH为6和接菌量10%时其具有较优的除磷效果。《安徽农业科学》2011年第39卷第1期447-451页报道了陈燕等利用含磷的牛肉膏蛋白胨培养基获得聚磷能力大于95%的聚磷节杆菌(Arthrobacter sp.)。
本发明制备的一种适合于培养聚磷菌的培养基(命名为CCZU),利用该培养基可以快速高效的从污泥中筛选分离出聚磷菌。
发明内容
本发明的目的在于提供一种适合于培养聚磷菌的培养基(命名为CCZU),该培养基可以替代聚磷菌筛选以及培养用的牛肉膏蛋白胨培养基。
本发明的另一目的在于提供CCZU培养基的制备方法。
所述CCZU培养基组成为,在1L的蒸馏水中含有:
所述CCZU培养基组成最佳为,在1L的蒸馏水中含有:
所述CCZU培养基的制备方法为:
将(NH4)2SO4、Na2HPO4、KH2PO4、MgSO4·7H2O、CaCl2、柠檬酸钠、NaCl、蔗糖、琼脂粉加入蒸馏水中定容至1L,灭菌后即得聚磷菌的培养基。
所述灭菌,可采用高压灭菌,所述高压灭菌的条件可为121℃,20min。
本发明的有益效果在于:由于本发明的CCZU培养基采用多种成分作为培育聚磷菌所需摄取的营养物质,作为聚磷菌的专性培养,因此培养基中添加了大量磷成分,可用于聚磷菌的常规分离与培养,缩短了聚磷菌筛选所需时间,同时由于本发明的培养基没有使用生化试剂,从而有效的避免了生化培养基易变质的缺点,延长了培养基的保质期,也减少了由于多次转接菌种造成的菌种传代次数增加。
附图说明
图1为聚磷菌B5在高磷含量聚磷菌培养基CCZU上菌落形态;
图2为CCZU培养的B5菌的16h除磷性能。在图2中,横坐标为培养时间(h),左纵坐标为处理废水上清液的总磷(TP)浓度(mg/L),右纵坐标分别为B5处理废水的除磷率、波长在600nm下的光密度值(OD600);柱状图为OD600分布,折线图为B5处理水样中TP浓度和水样中TP的去除率。
具体实施方式
实施例1:聚磷菌培养基CCZU及其制备方法
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