[发明专利]一种L-赖氨酸的发酵方法

权利要求书

1.一种L-赖氨酸的发酵方法，包括以下步骤：将赖氨酸摇瓶种子接入赖氨酸一级种子培养基培养成熟后，再接入赖氨酸二级种子培养基培养，待达到赖氨酸二级种子成熟标准后，接入赖氨酸发酵培养基，在流加碳源和氮源的条件下，进行发酵培养至发酵终点；所述赖氨酸一级种子培养基、赖氨酸二级种子培养基和赖氨酸发酵培养基中的氮源为氯化铵，发酵培养过程中流加的氮源为氯化铵。

2.根据权利要求1所述的发酵方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)赖氨酸一级种子培养：赖氨酸摇瓶种子接入赖氨酸一级种子培养基在一级种子罐中培养，一级种子罐中氯化铵的初始浓度为8-12g/L，当一级种子培养基中总糖浓度下降至8-15g/L时，停止培养，得成熟赖氨酸一级种子液；

(2)赖氨酸二级种子培养：将成熟赖氨酸一级种子液接入赖氨酸二级种子培养基在二级种子罐中培养，二级种子罐中氯化铵的初始浓度为10-15g/L，当二级种子培养基中还原糖浓度下降至5-8g/L时，停止培养，得成熟赖氨酸二级种子液；

(3)赖氨酸发酵培养：将成熟赖氨酸二级种子液接入赖氨酸发酵培养基中，在流加葡萄糖溶液和氯化铵溶液的条件下，在发酵罐中发酵培养，发酵罐中的氯化铵初始浓度为9-14g/L，培养40-44小时，得L-赖氨酸。

3.根据权利要求1或2所述的发酵方法，其特征在于：赖氨酸一级种子培养基包括蔗糖20-40g/L，硫酸镁0.5-1.5g/L，磷酸二氢钾0.5-1.5g/L，氯化铵8-12g/L，酵母浸粉5-10g/L，苏氨酸0.4-0.6g/L，蛋氨酸0.4-0.6g/L，味精7-10g/L，丙酮酸钠0.5-0.8g/L。

4.根据权利要求1或2所述的发酵方法，其特征在于：赖氨酸二级种子培养基包括葡萄糖60-80g/L，硫酸镁0.5-1.5g/L，磷酸二氢钾0.5-1.5g/L，氯化铵10-15g/L，玉米浆水解液1-1.5g/L，毛发水解液1-1.5g/L，甜菜糖蜜10-15ml/L，苏氨酸0.4-0.6g/L，蛋氨酸0.4-0.6g/L。

5.根据权利要求1或2所述的发酵方法，其特征在于：赖氨酸发酵培养基包括葡萄糖20-40g/L，硫酸镁0.5-1.5g/L，磷酸0.3-0.5ml/L,氯化铵9-14g/L，玉米浆水解液0.5-1g/L，毛发水解液0.5-1g/L，甜菜糖蜜10-15ml/L，甜菜碱0.5-0.8g/L。

6.根据权利要求2所述的发酵方法，其特征在于：步骤(3)流加葡萄糖溶液和氯化铵溶液的方法为：发酵培养过程中每2-4h取样测发酵液的还原糖浓度和氨氮浓度，当发酵液中的还原糖浓度下降至4-8g/L时，开始流加质量体积浓度为50-60％葡萄糖溶液并维持发酵液的还原糖浓度为4-8g/L，当发酵液中的氨氮浓度下降为1-2g/L时，开始流加质量体积浓度为25-28％氯化铵溶液并维持发酵液中的氨氮浓度为1-2g/L。

7.根据权利要求6所述的发酵方法，其特征在于：流加质量体积浓度为28％的氯化铵溶液。

8.根据权利要求2所述的发酵方法，其特征在于：步骤(1)赖氨酸摇瓶种子的接种量为赖氨酸一级培养基体积的1-3‰，培养过程中控制溶氧30％-50％。

9.根据权利要求2所述的发酵方法，其特征在于：步骤(2)成熟赖氨酸一级种子液的接种量为赖氨酸二级培养基体积的2-5％，培养过程中控制溶氧30％-50％。

10.根据权利要求2所述的发酵方法，其特征在于：步骤(3)成熟赖氨酸二级种子液的接种量为赖氨酸发酵培养基体积的10-15％，培养过程中控制溶氧25％-40％。