[发明专利]人源化的FcγR小鼠

权利要求书

1.一种制备包含遗传修饰的小鼠的方法，包括工程化小鼠以包含内源FcγRIIBα链基因中的纯合破坏、内源FcγRIVα链基因中的纯合破坏、内源FcγRIIIα链基因中的纯合破坏。

2.如权利要求1所述的方法，其中小鼠包括与野生型小鼠对于相同抗原的能力相比较减小的对抗原产生免疫应答的能力。

3.如权利要求1所述的方法，其中小鼠包括至少50％减小的抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)。

4.如权利要求1所述的方法，其中小鼠包含功能性的FcRγ链。

5.如权利要求1至4中任一项所述的方法，其中小鼠表达人CD20。

6.一种遗传修饰的小鼠细胞，其基因组包含内源FcγRIIBα链基因中的纯合破坏，内源FcγRIVα链基因中的纯合破坏，内源FcγRIIIα链基因中的纯合破坏。

7.如权利要求6所述的细胞，其中细胞包含功能性的FcRγ链。

8.如权利要求6所述的细胞，其中细胞是胚胎干(ES)细胞。

9.如权利要求6所述的细胞，其中细胞是天然杀伤(NK)细胞。

10.如权利要求6至9中任一项所述的细胞，其中细胞包含人CD20基因。

11.一种鼠细胞，其基因组包含以至少两个低亲和力人FcγRα链基因替代内源低亲和力FcγRα链基因，其中细胞包含功能性内源FcRγ链并且功能性地表达至少两个低亲和力人FcγRα链基因。

12.如权利11所述的鼠细胞，其中细胞是淋巴细胞。

13.如权利要求12所述的鼠淋巴细胞，其中淋巴细胞是B细胞。

14.如权利要求12所述的鼠淋巴细胞，其中淋巴细胞是天然杀伤细胞。

15.如权利要求11所述的鼠细胞，其中细胞是鼠胚胎干细胞。

16.如权利要求11至15中任一项所述的鼠细胞，其中至少两个低亲和力人FcγRα链基因选自下组：人FcγRIIAα链基因、人FcγRIIBα链基因、人FcγRIICα链基因、人FcγRIIIAα链基因和人FcγRIIIBα链基因。

17.如权利要求11至15中任一项所述的鼠细胞，其中至少两个低亲和力人FcγR基因是人FcγRIIAα链基因和人FcγRIIIAα链基因。

18.如权利要求17所述的鼠细胞，其中人FcγRIIIAα链基因包括在氨基酸位点158上的苯丙氨酸。

19.如权利要求17所述的鼠细胞，其中人FcγRIIIAα链基因包括在氨基酸位点158上的缬氨酸。

20.如权利要求11至15中任一项所述的鼠细胞，其中，鼠细胞的基因组包含人FcγRIIBα链基因、人FcγRIICα链基因和人FcγRIIIBα链基因。

21.如权利要求13所述的B细胞，进一步包含编码人CD20蛋白的人核苷酸序列。

22.一种鼠胚胎，包括权利要求15所述的胚胎干细胞。

23.一种鼠天然杀伤细胞，其基因组包括替代内源FcγRIIB、FcγRIII和FcγRIVα链基因的人FcγRIIIAα链基因，其中细胞功能性地表达人FcγRIIIAα链基因和在其表面上的鼠FcRγ链。

24.一种制备遗传修饰的鼠科动物的方法，其基因组包含以至少两个低亲和力人FcγRα链基因替代内源低亲和力FcγRα链基因，包括使用权利要求15所述的鼠胚胎干细胞。

25.一种制备遗传修饰的鼠胚胎干细胞的方法，其基因组包含以至少两个低亲和力人FcγRα链基因替代内源低亲和力FcγRα链基因，该方法包括以至少两个低亲和力人FcγRα链基因替代鼠胚胎干细胞基因组中的内源低亲和力FcγRα链基因。

26.如权利要求22所述的方法，其中内源低亲和力FcγRα链基因被人FcγRIIAα链基因和人FcγRIIIAα链基因替代。