[发明专利]一种基于多重延伸连接的探针扩增方法、其用途和试剂盒

说明书

本发明涉及一种基于多重延伸连接的探针扩增方法、其用途和试剂盒。进一步地，本发明涉及本发明的基于多重延伸连接的探针扩增方法用于检测葡萄糖‑6‑磷酸脱氢酶基因SNP的用途以及用于本发明的方法的试剂盒。

技术领域

本发明涉及基于多重延伸连接的探针扩增法的技术领域。更特别地，本发明涉及根据本发明的方法用于检测葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因SNP的用途；以及用于本发明方法的试剂盒。

背景技术

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(Glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD)是胞浆中一种重要的酶，广泛存在于所有细胞内，对红细胞的完整性和正常功能尤其重要。葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏(Glucose-6-phosphate dehydrogenase deficiency,G6PDd)是最常见的遗传性酶病。据估计，全世界至少有4亿人携带G6PD缺陷的基因，其中大约有3.5亿分布于疟疾流行国家，参见Nkhoma ET,Poole C,Vannappagari V,Hall SA,Beutler E:The globalprevalence of glucose-6-phosphate dehydrogenasedeficiency:a systematic reviewand meta-analysis.Blood Cells Mol Dis 2009,42:267-278。尽管G6PD缺乏的患病率在不同的国家、不同地区、不同人群之间有很大差别，但其在疟疾流行国家的流行率高达8％，参见Howes RE,Piel FB,Patil AP,Nyangiri OA,Gething PW,Dewi M,Hogg MM,BattleKE,Padilla CD,Baird JK,Hay SI:G6PD deficiency prevalence and estimates ofaffected populations in malaria endemic countries:a geostatistical model-based map.PLoS Med 2012,9:e1001339。G6PD缺乏已成为世界范围内特别是疟疾流行地区重要的公共卫生问题。

G6PD缺乏是由于编码葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的G6PD基因的突变引起酶的活性下降，表现出G6PD缺乏的表型。G6PD基因位于X染色体长臂2区8带(Xq28)，全长约18kb，包含13个外显子，12个内含子，参见Martini G,Toniolo D,Vulliamy T,Luzzatto L,Dono R,Viglietto G,Paonessa G,D'Urso M,Persico MG:Structural analysis of the X-linked gene encoding human glucose 6-phosphate dehydrogenase.EMBO J 1986,5:1849-1855，编码含515个氨基酸的蛋白亚基，有活性的G6PD酶由两个或四个亚基组成，参见Au SW,Naylor CE,Gover S,Vandeputte-Rutten L,Scopes DA,Mason PJ,Luzzatto L,LamVM,Adams MJ:Solution of the structure of tetrameric human glucose 6-phosphatedehydrogenase by molecular replacement.Acta Crystallogr D Biol Crystallogr1999,55:826-834。