[发明专利]海洋真菌来源的Azaphilone类化合物在制备抗结核药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及药物化合物领域，具体地说，涉及一类Azaphilone类化合物在作为抗结核药物中的应用。

背景技术

占有地球表面积70％的海洋孕育了数以万计且活性多样化的海洋微生物。为了能在高盐度、高压、低营养等极限环境下生存，海洋微生物已发展出独特的代谢方式。海洋真菌在特殊环境之中，已发展出独特的代谢方式，能够产生结构新颖、生理活性显著的各类次级代谢产物。其代谢产物具有抗菌、抗肿瘤、免疫调节、酶抑制等多种药用价值。目前，从包括海洋真菌在内的海洋微生物中寻找新的药源已成为国际国内研究的热点。

结核病是由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)引起的严重危害人类健康的传染性疾病。对结核病机理的研究和针对特异靶点进行的抗结核新药的研制直接关系到人类的健康和社会的发展。由结核分枝杆菌分泌的酪氨酸磷酸酶(mPTPB)是结核分枝杆菌的重要毒力因子，是造成肺结核的重要原因。mPTPB被结核分枝杆菌分泌后进入巨噬细胞中，阻止宿主免疫系统的启动，调节杆菌在宿主中的存活。mPTPB是结核药物筛选新的靶点。抑制结核杆菌分泌的mPTPB，可以阻止结核杆菌对宿主免疫产生抑制作用，有助于宿主对结核杆菌产生免疫，从而达到治疗结核病的目的。

发明内容

本发明的目的是提供上述Azaphilone类化合物及其在制备抗结核药物中的应用。

本发明上述目的通过以下技术方案予以实现：

一类聚酮类衍生物其结构式如(I)所示：

本发明Azaphilone类化合物的制备方法包括如下步骤：

(1)将海洋真菌曲霉Aspergillussp.HNY16-5C的菌株从斜面培养基中接入种子培养基，摇床培养，得到种子培养液(所述海洋真菌曲霉Aspergillussp.HNY16-5C的保藏单位为中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国武汉市武汉大学，保藏号为CCTCC M 2012358，保藏日期为2012年9月19日)；

(2)将种子培养液接入发酵培养基中，静置培养；

(3)将发酵产物过滤得到菌体，菌体用甲醇浸泡，减压浓缩，得到浸膏，再经层析分离，得到聚酮类衍生物1。

作为一种优选方案，上述制备方法中，步骤(1)所述种子培养基的组分为：葡萄糖40g，蛋白胨4g，酵母膏4g，海盐5g，水2L。

作为一种优选方案，上述制备方法中，步骤(2)所述发酵培养基的组分为：葡萄糖2000g，蛋白胨200g，酵母膏200g，海盐250g，水100L。

作为一种优选方案，上述制备方法中，步骤(1)所述摇床培养条件为：转速200rpm，温度28℃，培养时间72h。

作为一种优选方案，上述制备方法中，步骤(2)所述静置培养温度为25℃，培养时间为28天。

作为一种优选方案，上述制备方法中，步骤(3)所述浸膏用硅胶柱层析进行分离，分离用5％、10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、100％的乙酸乙酯/石油醚梯度淋洗。

作为一种优选方案，上述制备方法中，所述30％乙酸乙酯--石油醚洗脱部分经过葡聚糖凝胶Sephadex LH-20层析，洗脱剂为甲醇：氯仿＝1：1(体积比)，再多次重结晶得到化合物1。

本发明Azaphilone类化合物1对结核杆菌酪氨酸磷酸酶(mPTPB)有抑制作用，可用于制备抗结核药物。

与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：本发明的Azaphilone类化合物1来源于南海红树林真菌Aspergillussp.HNY16-5C，从真菌提取分离的方法简单，成本低廉；Azaphilone类化合物1对结核杆菌酪氨酸磷酸酶(mPTPB)有显著抑制活性，应用前景广阔。

具体实施方式

以下结合实施实例进一步解释本发明，但实施实例并不对本发明做任何形式的限定。

实施例1：

本发明的化合物，可以从海洋真菌曲霉Aspergillussp.HNY16-5C的菌体中分离得到。海洋真菌曲霉Aspergillussp.HNY16-5C是从海南海口海域红树植物无瓣海桑S.apetala的叶子中分离得到。具体步骤如下：

1.种子培养：

(1)配制种子培养基：葡萄糖40g,蛋白胨4g，酵母膏4g，海盐5g，自来水2000mL，平均分装于8个500mL锥形瓶，121℃灭30分钟。