[发明专利]一种用于硫化氢检测的比率型荧光探针及其制备方法

权利要求书

1.一种用于硫化氢检测的比率型荧光探针，其特征在于，该探针的化合物为2-(6-叠氮基-1,3-二氧-苯并异喹啉基)乙基2-(4-((4-(1,2,2-三苯基乙烯基)苯氧基)甲基)-1,2,3–三氮唑基)乙基)丁二酸酯，具有如下结构式：

2.权利要求1所述的用于硫化氢检测的比率型荧光探针的制备方法，其特征在于包含以下步骤：

1)将4-溴-1,8-萘二甲酸酐溶于乙醇，搅拌条件下，在氮气保护下滴加2-氨基乙醇；4-溴-1,8-萘二甲酸酐与2-氨基乙醇的摩尔比为1:1.1-1.2；将混合溶液加热至回流，控制温度为80℃-85℃；冷却至室温后，过滤并收集析出物，将析出物用乙醇重结晶，得到固体6-溴-2-(2-羟乙基)-苯并异喹啉-二酮；

将所述固体6-溴-2-(2-羟乙基)-苯并异喹啉-二酮与叠氮化钠溶于N,N-二甲基甲酰胺中，溶液在加热条件下搅拌反应，加热温度为100℃-110℃，反应(8-10)小时；冷却至室温，加入去离子水，然后用乙酸乙酯进行萃取；收集有机相，将有机相用盐水洗涤，干燥，过滤；旋转蒸发除去有机溶剂，所得固体经硅胶层析柱纯化，得到固体6-叠氮基-2-(2-羟乙基)-苯并异喹啉-二酮；所述6-溴-2-(2-羟乙基)-苯并异喹啉-二酮与叠氮化钠的摩尔比1:10-1：12；

2)将二苯甲酮和4-羟基二苯甲酮溶于四氢呋喃中，冰浴条件下加入锌粉，滴加将四氯化钛，撤去冰浴，先室温下反应(0.5-1)小时，而后加热回流(10-15)小时，控制温度为67℃-70℃；冷却至室温后，加入碳酸钾水溶液洗涤，用乙酸乙酯萃取，有机相再用盐水洗涤，干燥，过滤；旋转蒸发除去有机溶剂，所得固体经硅胶层析柱纯化，得到固体4-(1,2,2-三苯基乙烯基)苯酚；所述4-羟基二苯甲酮与二苯甲酮的用量摩尔比为(1.1-1.2):1；锌粉与4-羟基二苯甲酮用量的摩尔比为(2-2.5):1；四氯化钛与锌粉摩尔比为(0.5-0.6):1；

将4-(1,2,2-三苯基乙烯基)苯酚和3-溴-1-丙炔溶于N,N-二甲基甲酰胺中，加入碳酸钠，然后加热反应过夜，加热温度为60℃-80℃；冷却至室温后，旋转蒸发除去有机溶剂，用二氯甲烷/去离子水萃取，水层用二氯甲烷洗涤，收集有机相，干燥，过滤；旋转蒸发除去滤液中的溶剂，得到褐色油状物经硅胶层析柱纯化，得到浅褐色固体2-(4-(丙炔氧基苯基)乙烯基-1,1,2三苯；所述3-溴-1-丙炔与4-(1,2,2-三苯基乙烯基)苯酚的摩尔比为(1.1-1.2):1；碳酸钠与3-溴-1-丙炔的摩尔比为(1-1.05):1；

将2-(4-(丙炔氧基苯基)乙烯基-1,1,2三苯和2-叠氮基乙醇溶于四氢呋喃中，加入五水硫酸铜和抗坏血酸钠，然后加热反应，加热温度为35℃-45℃，反应时间为20-24小时；冷却至室温，旋转蒸发除去四氢呋喃后，用二氯甲烷/去离子水萃取，收集有机相，干燥，过滤，旋转蒸发除去溶剂，所得固体经硅胶层析柱纯化，得到固体2-(4-((1,2,2-三苯基乙烯基)苯氧基)甲基)-1,2,3-三氮唑-乙醇；所述2-叠氮基乙醇、五水硫酸铜和抗坏血酸钠与2-(4-(丙炔氧基苯基)乙烯基-1,1,2三苯用量的摩尔比分别为(2.5-3):1、(0.1-0.15):1和(0.2-0.3):1；

将2-(4-((1,2,2-三苯基乙烯基)苯氧基)甲基)-1,2,3-三氮唑-乙醇和丁二酸酐溶于二氯甲烷中，加入4-二甲胺基吡啶，室温下反应；旋转蒸发除去溶剂，得到固体4-氧代-4-(2-(4-((4-(1,2,2-三苯基乙烯基)苯氧基)甲基)-1,2,3-三氮唑)乙氧基)丁酸；丁二酸酐和4-二甲胺基吡啶与2-(4-((1,2,2-三苯基乙烯基)苯氧基)甲基-1,2,3-三氮唑-乙醇的摩尔比分别为(1-1.05):1和(0.05-0.06):1；

3)将4-氧代-4-(2-(4-((4-(1,2,2-三苯基乙烯基)苯氧基)甲基)-1,2,3-三氮唑)乙氧基)丁酸和6-叠氮基-2-(2-羟乙基)-苯并异喹啉-二酮溶于四氢呋喃中，加入4-二甲胺基吡啶和N,N’-二异丙基碳二亚胺，加热反应过夜，加热温度为30℃-35℃；反应时间为(16-20)小时；冷却至室温，旋转蒸发除去有机溶剂后，用二氯甲烷溶解，并用去离子水萃取两次，盐水萃取，收集有机相干燥，过滤，旋转蒸发除去溶剂，所得固体经硅胶层析柱纯化，得到固体探针化合物2-(6-叠氮基-1,3-二氧-苯并异喹啉基)乙基2-(4-((4–(1,2,2-三苯基乙烯基)苯氧基)甲基)-1,2,3–三氮唑基)乙基)丁二酸酯；所述6-叠氮基-2-(2-羟乙基)-苯并异喹啉-二酮、N,N'-二异丙基碳二亚胺与4-氧代-4-(2-(4-((4-(1,2,2-三苯基乙烯基)苯氧基)甲基)-1,2,3-三氮唑)乙氧基)丁酸的摩尔比分别为(1-1.2):1和(1.2-1.5):1；所述4-二甲胺基吡啶与N,N'-二异丙基碳二亚胺的摩尔比为(0.05-0.06):1。