[发明专利]一种自组装多肽、其制备方法、其核酸复合物及用途

说明书

本发明提供了一种用于将核酸转染到细胞内的自组装多肽，该自组装多肽的制备方法，该自组装多肽与核酸的复合物，以及将目标核酸转染到细胞内的方法。具有特殊理化性质的该自组装多肽与DNA或RNA分子形成复合物，能够有效提高核酸的稳定性。采用本发明的载剂，细胞转染可以在血清存在的条件下进行，而且转染时间可以延长至数天。在使用本发明中自组装多肽进行细胞转染时，无需特意去处血清，从而大大降低了转染时试剂对细胞造成的毒性。

技术领域

本发明涉及细胞生物学领域，尤其涉及细胞生物学领域的基础研究所使用的试剂。具体而言，本发明涉及一种自组装多肽，其制备方法，其核酸复合物及用途。

背景技术

DNA或RNA片段插入体细胞或细胞系的过程即为细胞转染技术。细胞转染技术分为化学方法与物理方法，物理法即电穿孔法，某些条件下可用，但易导致较高的细胞毒性，化学法因其操作的简便且价格低廉而发展迅速。

化学法通常包括脂质体转染法(目前应用最多的转染方法，很多文献中如无特意标明化学法即指脂质体法)、磷酸钙法、DEAE-葡聚糖介导法。

但是，脂质体技术有其缺陷，脂质体在血清存在的条件细胞转染效率极低，而且对细胞具有一定的毒性。在RNA、病毒，的转染试验中，因为RNA极其不稳定，就造成了使用脂质体进行RNA转染时效率较低。

磷酸钙法转染细胞简单、实用,但有一定的局限性,对细胞有一定的选则性，平均每个培养皿中约有10％的细胞捕获了外源转染DNA。

DEAE-葡聚糖介导法转染效率较高,但突变性也较高,不适用分离稳定的转染细胞，DEAE-葡聚糖用于克隆基因的瞬时表达,不能使细胞稳定转染，它对BSC-1、CV-1、COS等细胞系非常有效,但对其他类型的细胞转染效果不理想。目前RNA转染仍然需要不断的尝试，对于不同的细胞系，转染的效率往往不同，对于相同的细胞系，不同的转染试剂结果亦会不同，因此转染过程中需要不断的尝试来达到较好的效果。

目前RNA转染已经被应用到各个领域中，比如说细胞信号转到分析、冗余基因确定、基因功能的检测、基因治疗和药物研发。通常药物研发需要靶标辨别、靶标验证、治疗与开发、模式生物实验、临床治疗几个过程，新兴的RNA介导RNAi成为了靶标介导的最后一道有力工序。

为了提高转染的效率，提高RNA的稳定性是一个需要研究的课题。

多肽作为一种生物物质，具有生物利用度高，毒性小和特异靶向等良好的生理功能越来越受到药物创新研究者的青睐。但是多肽作为药物在临床上的应用受到了其物理和化学性质的极大限制。多肽作为药物辅助功能的应用逐渐成为了新药研制的热点之一，多肽的两性特征使其通过细胞膜具有可能性，因此可能作为转染的工具。

发明内容

因此，本发明的发明目的是针对目前的转染试剂转染效率低，转染的核酸不稳定的不足，提供一种核酸转染载试剂，从而提高核酸的稳定性，并使转染在血清存在下也能进行。

结合本发明的目的对本发明的各个方面逐一加以描述：

在本发明的一个方面，提供了下述式I所示的序列的自组装多肽：

GLWWX₁X₂WWX₃X₄WWX₅X₆X₇WWX₈X₉X₁₀X₁₁X₁₂X₁₃(n)X₁₄

式I

(SEQ ID NO：1)

其中，X₁为Lys或Arg；