[发明专利]一种通量定量测定菌株降氮能力的方法在审
| 申请号： | 201410460950.2 | 申请日： | 2014-09-11 |
| 公开（公告）号： | CN105400861A | 公开（公告）日： | 2016-03-16 |
| 发明（设计）人： | 胡婷;马青山;贠锦军;何增国 | 申请（专利权）人： | 北京大北农科技集团股份有限公司;福建大北农水产科技有限公司;天津昌农科技有限责任公司 |
| 主分类号： | C12Q1/06 | 分类号： | C12Q1/06;C12R1/125 |
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| 地址： | 100086 北京市海*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 通量 定量 测定 菌株 能力 方法 | ||
1.一种通量定量测定菌株降氮能力的方法，其特征在于：将待测菌株菌液接入相应的以粉碎虾料为唯一碳源的筛选培养基中，振荡培养后，将培养物离心取上清液，加入96孔板；测定亚硝态氮时，在96孔板中加入待测样上清液后，每孔先后加入格里斯试剂A、B，于550nm测定吸光值；测定氨氮时每孔加入纳氏试剂，于450nm测定吸光值，然后通过建立的标准曲线计算出体系中剩余氮浓度，从而计算出菌株的降氮功效。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，亚硝态氮浓度Y1与测定OD值X1之间参考标准曲线为Y1=3.508X1-0.191；氨氮浓度Y2与测定OD值X2之间参考标准曲线为Y2=14.085X2-0.620。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，待测菌株接种终浓度为5×104-5CFU/mL。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，测定亚硝态氮时，菌株培养物上清液与格里斯试剂A、B的体积比为10:1:1；测定氨氮时，菌株培养物上清液与纳氏试剂的体积比为10:1。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，菌株振荡培养条件为培养28-33℃，150-200r/min，培养24-48h。
6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的NO2--N由NaNO2提供，亚硝态氮浓度为2.5mg/l；所述的NH4+-N由(NH4)2SO4提供，铵态氮浓度为2.5mg/l。
7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的粉碎虾料的浓度为1.0g/L。
8.如权利要求1~7任一项所述的方法，其特征在于，所述的菌株为芽孢杆菌。
9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述的芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌。
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