[发明专利]幽门螺杆菌分离培养的样本组织的专用保存、运输培养基

说明书

(一)技术领域

本发明涉及携带有微生物的样本的保存运送技术，特别涉及到一种携带有幽门螺杆菌的样本组织的保存、运输培养基。

(二)背景技术

幽门螺杆菌(Helicobacterpylori，HP)是慢性活动性胃炎、消化性溃疡、胃黏膜相关淋巴组织(MALT)淋巴瘤和胃癌等疾病的主要致病因素。1994年世界卫生组织/国际癌症研究机构(WHO/IARC)将幽门螺杆菌定为I类致癌原，是目前唯一被列为致癌因子的原核生物性病原微生物。由于其为微需氧菌，环境氧要求为5～8％，在大气或绝对厌氧环境下不能生存，生长营养条件较高，而普通培养基在保存或运输携带有幽门螺杆菌的样品过程中会造成大量幽门螺杆菌的死亡，给临床检验及相关疾病的研究带来了极大不便。因此，对携带有幽门螺杆菌的样本进行正确保存、运送成为了该微生物分离培养成功与否的关键。

目前市场上尚未有单独针对携带有幽门螺杆菌的样本的保存、运送培养基，而常用的保存运送培养基可保存运送的菌种种类广泛，且这类培养基在形态上多为固体或半固体琼脂培养基，虽能在一定程度上保存样本中微生物的活性，但依然存在易破碎、粘附性高、样本中幽门螺杆菌存活率极低等缺点。导致样品保存不完整，最终影响检验结果。

本发明不仅成功模拟了相似于感染人体体液的环境(pH值在7.35～7.45之间)，更有效抑制了其它微生物的污染，使得携带有幽门螺杆菌的样本组织保存于这种保存、运送培养基中，既能使组织保持活性，又能使存在于该组织内的幽门螺杆菌维持在较高存活和繁殖的水平，明显提高了检验的效率和准确性。

(三)发明内容

本发明为了弥补针对幽门螺杆菌的样本组织的保存、运输的空白。提供了一种方法简便，且对幽门螺杆菌检存活率较高的保存、运送携带有幽门螺杆菌的样本的培养基。并对该培养基进行了科学系统的生物学性能鉴定。

本发明是通过如下技术方案实现的：

一种幽门螺杆菌分离培养的样本组织专用保存、运送培养基。其特征为，由以下重量份数的原料配制而成：Na₂HPO₄.12H₂O(分析纯)27～32份、NaH₂PO₄.H₂O(分析纯)2～4份、蛋白胨8～12份、胰蛋白胨8～12份、葡萄糖0.5～1.5份、氯化钠6～8份、亚硫酸钠0.05～0.15份、其余为去离子水，共计1000份，无水碳酸氢钠适量调节PH至7.4～7.6，高温高压后加入万古霉素10‰份、两性霉素5‰份。

其优选的各原料的重量配比为：

Na₂HPO₄.12H₂O(AR)(分析纯)29.04g、NaH₂PO₄.H₂O(分析纯)2.62g、蛋白胨10g、胰蛋白胨10g、葡萄糖1g、氯化钠7g、亚硫酸钠0.1g、其余为去离子水，共计1000ml，无水碳酸氢钠适量调节PH至7.4～7.6，高温高压后加入万古霉素10mg、两性霉素5mg。

本发明原料中的蛋白胨、胰胨、葡萄糖等物质可给样本组织提供保持活性的必需营养物质，其中氯化钠的含量为0.7％，为幽门螺杆菌存活的最佳渗透压浓度，重亚硫酸钠的水溶液还原性较强，可使幽门螺杆菌的局部环境为微需氧，有利于幽门螺杆菌生长繁殖。使用两种抗生素的目的为抑制和杀灭在采集样本过程中受到的其它微生物的污染，保证和提高样品中幽门螺杆菌的存活率。

所述培养基为液体培养基，配制原料中的各种物质发挥各自的作用，达到既保存样本组织自身的活性，又能使幽门螺杆菌在脱离机体后的组织中还能达到较好的存活。

(四)具体实施方式

实施例1

制备方法：

1、原材料干燥：

将Na₂HPO₄.12H₂O(分析纯)、NaH₂PO₄.H₂O(分析纯)、葡萄糖、氯化钠、亚硫酸钠和无水碳酸氢钠分别置于不锈钢盘中，放入80℃的烘箱中，烘烤至恒重。

2、称量：

Na₂HPO₄2306g、NaH₂PO₄456g、蛋白胨2000g、胰蛋白胨2000g、葡萄糖200g、氯化钠1400g、亚硫酸钠20g、无水碳酸氢钠约160g。