[发明专利]一种高通量、高灵敏度、表面激光解析质谱纳米靶板及其制作方法和应用

权利要求书

1.一种高通量、高灵敏度、表面激光解析质谱纳米靶板，其特征在于，氧化硅芯板一面是纳米结构，其纳米空隙在40－100纳米之间，在芯板纳米结构一面，涂有一层抗酸抗碱、抗各种有机溶剂、有耐高温、沸点低，摩擦系数极低的高分子材料。 

2.权利要求1所述的一种高通量、高灵敏度、表面激光解析质谱纳米靶板的制作方法，其特征在于， 

①将氧化硅芯板单面抛光，达到电阻率0.01-0.02欧姆厘米； 

②将抛光的原始芯板切割成根据需要的大小； 

③用体积比为50-75％硫酸和体积比为1％－5％的氢氟酸混合物侵泡表面5分钟，同时加以5v电压30分钟，帮助芯板整体表面纳米结构化，其纳米空隙在40－100纳米之间； 

④使用离子纯净水清洗N次，N≧2； 

⑤晾干； 

⑥在芯板表面均匀涂上一层抗酸抗碱、抗各种有机溶剂、有耐高温、摩擦系数极低的高分子材料。 

3.权利要求1所述的一种高通量、高灵敏度、表面激光解析质谱纳米靶板的应用，其特征在于，应用于小分子定性定量分析检测和高通量筛选。 

4.根据权利要求3所述的一种高通量、高灵敏度、表面激光解析质谱纳米靶板的应用，其特征在于，应用于小分子定性定量分析检测和高通量筛选过程中样品制备和分析两步， 

样品制备：包括细胞培养液样品制备试剂盒或细菌培养液样品制备试剂盒或血液样品制备试剂盒或水溶液样品制备试剂盒； 

样品分析步骤：①根据不同小分子检测对象加入同等体积的增强电离缓冲液；②离心，取上清液点在靶板上，放进ABI 5800 MALDI-TOF或者其他表面激光解析质谱进行分析检测。 

5.根据权利要求4所述的一种高通量、高灵敏度、表面激光解析质谱纳米靶板的应用，其特征在于， 

细胞培养液样品制备试剂盒，具体步骤如下：将细胞培养液样本放置室温，充分解冻；加入-20度同等体积的混合溶液-基本裂解液，在50度水浴中反应5分钟；离心；收集上清液；基本裂解液为QL1或QL2，QL1物质组成及体积比为：10-30％甲醇、70-90％乙氰、1-7％甲酸；QL2物质组成及体积比为：10-50％甲醇、50-90％乙氰、1-7％甲酸； 

血液样品制备试剂盒，具体步骤如下：将血液样本放置室温，充分解冻；加入抗凝剂抗凝，离心得血浆；加入基本裂解液QL3经沉淀蛋白，离心后收集上清液；QL3物质组成及体积比为：80-100％乙氰，1-7％甲酸； 

水溶液样品制备试剂盒，，具体步骤如下：将水溶液样本放置室温，充分解冻；加入-20度同等体积的混合溶液-基本裂解液QL4，在50度水浴中反应5分钟；离心，收集上清液；QL4物质组成及体积比为：50-100％甲醇，体积比1-7％的甲酸。 

6.根据权利要求4或5所述的一种高通量、高灵敏度、表面激光解析质谱纳米靶板的应用，其特征在于，增强电离缓冲液的种类： 

①若待测目标小分子是酸性结构，PH<4.加入同等体积的增强电离缓冲液QLB1；充分混合后，取样品点在靶板上即可送入表面激光解析质谱进行分析；QLB1物质组成及体积比为：50-70％甲醇，30-50％离子水，1-7％三氟乙酸； 

②待测目标小分子是碱性结构，pH>8.加入同等体积的增强电离缓冲液QLB2；充分混合后，取样品点在靶板上即可送入表面激光解析质谱进行分析；QLB2物质组成及体积比为：100％离子水，1-7％甲酸。 

7.根据权利要求3所述的一种高通量、高灵敏度、表面激光解析质谱纳米靶板的应用，其特征在于，应用于分子量小于3000da的小分子的分析检测和高通量筛选；新药及药物中间体的分析检测和高通量筛选，药物动力学和药理高通量筛查；药物毒理高通量筛查；多重不同分子结构小分子的同时检测和高通量筛选。 

8.根据权利要求7所述的一种高通量、高灵敏度、表面激光解析质谱纳米靶板的应用，其特征在于，应用于分子量小于3000da的小分子的分析检测和高通量筛选包括：针对小肽分子检测的样品制备试剂QLP和方法；氨基酸分子检测的样品制备试剂QLA和方法；脂肪酸分子检测的样品制备试剂QLF和方法；胆碱及脂类分子检测的样品制备试剂QLPC和方法；牛奶及饮品中三聚氰胺分子检测的样品制备试剂QLN和方法；在饮用水及污水中污染物小分子检测的样品制备试剂QLW和方法； 

针对小肽分子检测的样品制备试剂QLP和方法：用权利要求5中任一裂解液进行裂解制备样本，取上清后，加入同等体积的制备试剂QLP；充分混合；取溶液点在靶板上，通风处下静置后进样检测；QLP物质组成及体积比为：70-90％离子水，10-30％甲醇，1-5％甲酸； 

氨基酸分子检测的样品制备试剂QLA和方法:用权利要求5中任一裂解液进行裂解制备样本，取上清后，加入同等体积的制备试剂QLA；充分混合；取溶液点在靶板上，通风处下静置后进样检测；QLA物质组成及体积比为：30％离子水，30-50％甲醇，20-40％正丙醇1-5％甲酸； 

脂肪酸分子检测的样品制备试剂QLF和方法:将样本放置室温，充分解冻,加入-20度同等体积的试剂QLF，在50度水浴中反应5分钟；离心后，收集上清液；取上清后，加入同等体积的制备试剂QLB1；充分混合后，取溶液点在靶板上，静置后进样进样检测；QLF物质组成及体积比为：50-90％甲醇，10-50毫摩尔的氨水；QLB1物质组成及体积比为：50-70％甲醇，30-50％离子水，1-7％三氟乙酸； 

胆碱及脂类分子检测的样品制备试剂QLPC和方法：将样本放置室温，充分解冻,加入-20度同等体积的试剂QLPC，在50度水浴中反应5分钟；离心后，收集上清液；取上清后，加入同等体积的制备试剂QLB1；充分混合后，取溶液点在靶板上，静置后进样进样检测；QLPC物质组成及体积比为：50-90％甲醇，10-50％乙氰，10-50毫摩尔的氨水；QLB1物质组成及体积比为：50-70％甲醇，30-50％离子水，1-7％三氟乙酸； 

食品中三聚氰胺分子检测的样品制备试剂QLN和方法：将样本放置室温，充分解冻,加入-20度同等体积的试剂QLN，在50度水浴中反应5分钟；离心后，收集上清液；取上清后，加入同等体积的制备试剂QLB1；充分混合后，取溶液点在靶板上，静置后进样进样检测；QLN物质组成及体积比为：50-80％甲醇，20-50％乙氰，1-5％三氟乙酸；QLB1物质组成及体积比为：50-70％甲醇，30-50％离子水，1-5％三氟乙酸； 

在饮用水及污水中污染物小分子检测的样品制备试剂QLW和方法：将样本放置室温，充分解冻,加入-20度同等体积的试剂QLW，在50度水浴中反应5分钟；离心后，收集上清液；取上清后，加入同等体积的制备试剂QLB1；充分混合后，取溶液点在靶板上，静置后进样检测；QLW物质组成及体积比为： 50-100％甲醇，1-5％三氟乙酸；QLB1物质组成及体积比为：50-70％甲醇，30-50％离子水，1-5％三氟乙酸。