[发明专利]一种原位生成CdS真菌毒素光电化学传感器制备方法及应用

权利要求书

1.一种原位生成CdS真菌毒素光电化学传感器制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）将导电玻璃依次用丙酮、乙醇和超纯水超声清洗，氮气吹干；取6 μL、2~ 4 mg/mL二氧化铈掺杂的还原氧化石墨烯复合纳米材料滴加到导电玻璃的导电面，室温下晾干，400~500℃煅烧30~60 min，冷却，得到二氧化铈掺杂的还原氧化石墨烯复合纳米材料GS-CeO₂修饰的玻璃电极；

（2）在GS-CeO₂修饰的玻璃电极表面，滴加5 μL、0.1~1 μg/mL的真菌毒素抗体溶液，超纯水冲洗电极表面，4℃冰箱中晾干；

（3）继续滴加3 μL、质量分数为1~3%的BSA溶液，封闭电极表面上非特异性活性位点，超纯水冲洗电极表面，4℃冰箱中晾干；

（4）继续滴加5 μL真菌毒素混合溶液，超纯水冲洗电极表面，4℃冰箱中晾干，制得了真菌毒素光电化学传感器；

 所述真菌毒素混合溶液，是由等体积的TiO₂@Cd²⁺-Ag真菌毒素标记物溶液分别与不同浓度待测的真菌毒素溶液混合制得；

所述不同浓度待测的真菌毒素溶液，其浓度为0.1 pg/mL~10 ng/mL。

2.如权利要求1所述的一种原位生成CdS真菌毒素光电化学传感器制备方法，所述二氧化铈掺杂的还原氧化石墨烯复合纳米材料，其特征在于，制备步骤如下：配制1 mg/mL的氧化石墨烯水溶液，超声5~10 h，取20~50 mL与硝酸铈溶液混合搅拌5 min，转移至高压釜中，100℃加热反应20~30 h，离心洗涤，50℃真空干燥，制得粉末材料，置于马弗炉中400℃煅烧2~4 h，得到GS/CeO₂复合纳米材料；

所述硝酸铈溶液是由0.2 g六水合硝酸铈、8 mL超纯水和20 μL、2 mol/L的氢氧化钠溶液混合而成。

3.如权利要求1所述的一种原位生成CdS真菌毒素光电化学传感器制备方法，所述TiO₂@Cd²⁺-Ag真菌毒素标记物溶液，其特征在于，制备步骤如下：

（1）TiO₂的制备

钛酸四丁酯与乙二醇以体积比1 : 15 ~ 30混合，搅拌6~10 h，向50 mL混合液中加入150~200 mL丙酮，搅拌0.5~2 h，在乙醇中离心洗涤3次，加入10~30 mL水，100℃回流搅拌1~3 h，离心水洗3次，50℃真空干燥，在马弗炉中400℃煅烧2~4 h，制得TiO₂；

（2）TiO₂@Cd²⁺溶液的制备

取1 mL、20 mg/mL的TiO₂水溶液，加入10 mM Cd(NO₃)₂·4H₂O水溶液共混，50℃水浴振荡4~24 h，离心洗涤，制得的TiO₂@Cd²⁺；将其分散于水中，配制成10 mg/mL的TiO₂@Cd²⁺溶液；

（3）TiO₂@Cd²⁺-Ag真菌毒素标记物溶液的制备

取10 mL、10 mg/mL的TiO₂@Cd²⁺溶液与1 mL、体积分数为2.5~5%的戊二醛水溶液，振荡1~3 h，加入100～500 μL、10 μg/mL真菌毒素抗原，在4℃冰箱中振荡孵化20 h，离心，用pH为7.4的PBS洗涤，分散在1 mL pH为7.4的PBS中，制得TiO₂@Cd²⁺-Ag真菌毒素标记物溶液，4℃下保存备用。