[发明专利]一种构建大鼠高甘油三脂型急性胰腺炎模型的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种疾病的动物模型构建方法，具体来说，是一种构建大鼠高甘油三脂型急性胰腺炎模型的方法。

背景技术

目前，公知的建立大鼠实验性急性胰腺炎模型方法，即逆行胰胆管内注射5%牛黄胆酸钠建立大鼠SAP模型，该方法是向大鼠的胰胆管内逆行注射5%牛黄胆酸钠1.0ml/kg，注射速度0.1ml/min，注射持续10分钟。该方法仅模拟了临床上胰管梗阻、胆汁反流等病因的胰腺炎，而无法模拟高甘油三脂性胰腺炎的发病。

发明内容

本发明的目的在于提供一种构建大鼠高甘油三脂型急性胰腺炎模型的方法，解决现有技术无法模拟临床上高甘油三脂性胰腺炎的问题。

本发明通过下述技术方案实现：

一种构建大鼠高甘油三脂型急性胰腺炎模型的方法，包括以下步骤：

（1）选取雄性SD大鼠，并将其饲养成高脂血症；

（2）向上述雄性SD大鼠的动脉内注射游离脂肪酸，通过游离脂肪酸诱发急性胰腺炎。

进一步地，步骤（1）是向雄性SD大鼠喂食高脂饲料，将其饲养成高脂血症。

再进一步地，所述高脂饲料是由重量百分比为15%的猪油、10%的糖、4%的蛋黄、71%的基础饲料组成。

更进一步地，步骤（2）中游离脂肪酸的浓度为10mmol/L。

另外，步骤（2）中游离脂肪酸的注入量为0.5ml。

具体的，步骤（2）的具体步骤如下：

a、向雄性SD大鼠体腹腔内注射麻醉剂，对雄性SD大鼠进行麻醉；

b、将雄性SD大鼠固定于手术板上，剪毛、消毒、铺巾；随后逐层开腹，将腹腔内动脉暴露于腹腔外，向动脉内以10ml/h的速度注入游离脂肪酸3min；最后将动脉放回腹腔内，逐层关腹。

本发明的游离脂肪酸致病的机理如下：（1）高浓度的游离脂肪酸，直接对腺泡细胞产生毒性损伤，进而导致胰腺炎；（2）游离脂肪酸增多，腺泡细胞内酸碱度下降，在酸性环境，溶酶体水解酶组织蛋白酶B活性增强，胰蛋白酶原激活加速，腺泡细胞自身消化及胰腺炎的病理损害加重；（3）高浓度游离脂肪酸可引起胰腺毛细血管的内皮细胞损伤，高甘油三脂血症可使血液粘稠度增高，血液变血异常，重者形成微血栓，最终导致胰组织缺血、坏死。

本发明具有以下优点及有益效果：

本发明能够很好的模拟高甘油三脂性急性胰腺炎的发生，对以后高甘油三脂性胰腺炎的研究作了良好的铺垫。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步的说明，但本发明的实施方式并不限于此。

实施例

一种构建大鼠高甘油三脂型急性胰腺炎模型的方法，包括以下步骤：

1、选取150～250g的雄性SD大鼠；

2、诱导大鼠形成高脂血症：喂食4周的高脂饲料；

3、手术穿刺：

（1）经腹腔向大鼠进行注射戊巴比妥钠，使其麻醉；

（2）固定大鼠于手术板上，剪毛，常规消毒、铺巾；

（3）沿腹白线逐层开腹，从大鼠腹腔右侧钝、锐性分离暴露出前肠系膜动脉；

（4）仔细分离前肠系膜动脉与周围组织，用两根无菌丝线分别悬吊于前肠系膜动脉两端，并于动脉下方放置无菌塑料薄板，轻轻提拉两端丝线，提起前肠系膜动脉，使用针管外径为0.45mm的静脉输液针顺血流方向穿刺进入前肠系膜动脉0.5～0.7cm，使用消耗动脉夹夹住穿刺点，固定穿刺针；

（5）连接输液泵，以10ml/h持续泵入浓度为10mmol/L的游离脂肪酸试剂3min；

（6）拔除穿刺针，穿刺点用棉球压迫止血3min，随后逐层关腹。

对本发明构建的大鼠模型进行如下检测：

1、对本发明诱导高脂血症的方法进行检测：

分别选取两组健康状况、体重等均相同的雄性SD大鼠，第一组采用正常的饮食，第二组采用高脂饲料；饲养周期为4周；然后分别对两组雄性SD大鼠的甘油三酯（TG）进行检测，检测结果如下表1：

表1

△：与正常饮食组比较，p＜0.05

通过表1，说明雄性SD大鼠经过4周的高脂饮食，成功诱导了大鼠的高甘油三酯血症，成功的建立了高甘油三酯型胰腺炎模型的基础。

2、对本发明建立的胰腺炎模型进行以下检测：