[发明专利]用于扩增鳞翅目昆虫线粒体COI基因的特异性引物有效
| 申请号: | 201410446927.8 | 申请日: | 2014-09-03 |
| 公开(公告)号: | CN104164433A | 公开(公告)日: | 2014-11-26 |
| 发明(设计)人: | 陆明星;汤小天;杜予州 | 申请(专利权)人: | 扬州大学 |
| 主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12N15/10 |
| 代理公司: | 南京知识律师事务所 32207 | 代理人: | 卢亚丽 |
| 地址: | 225009 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 用于 扩增 鳞翅目 昆虫 线粒体 coi 基因 特异性 引物 | ||
1.一对用于鳞翅目昆虫线粒体COI基因序列扩增的引物,其特征在于,其序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。
2.一种鳞翅目昆虫线粒体COI基因序列扩增方法,其特征是采用权利要求1所述的的引物,用50μlPCR体系在特定PCR扩增条件下进行目标片段扩增。
3.如权利要求2所述的方法,其特征在于所述的50μl PCR体系是:5μl 10×buffer(+Mg2+),2.5μldNTP(2.5mM),3μl引物LeCOI-F(10μM),3μl引物LeCOI-R(10μM),0.5μl rTaq酶(5μ/μl),2μl DNA模板(100ng),34μl双蒸水。
4.如权利要求2所述的方法,其特征在于所述的特定的PCR扩增条件是:94℃预变性5分钟,94℃变性1分钟15秒,53℃退火温度1分钟15秒,72℃延伸1分钟5秒,共35个循环,最后72℃延伸10分钟。
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