[发明专利]裂壶藻半连续阶段式发酵、絮凝板框干法制取DHA的方法

权利要求书

1.裂壶藻半连续阶段式发酵、絮凝板框干法制取DHA的方法，包括以下步骤：

a)以裂壶藻为菌种，采用半连续、阶段式发酵方法，制备裂壶藻发酵液；

b)将制备好的裂壶藻发酵液调节为PH5～6，温度25～30℃，搅拌转速调整为100～120r/min，然后加入絮凝剂进行菌体的絮凝反应；

c)絮凝后的裂壶藻发酵液进行板框过滤、滤饼经过破碎造粒、快速闪蒸得到DHA微藻粉；

d)DHA微藻粉通过膨化压榨得到富含DHA的油脂。

2.根据权利要求1所述裂壶藻半连续阶段式发酵、絮凝板框干法制取DHA的方法，其特征在于：所述步骤a)中，采用三级种子罐逐步扩大培养种子。

3.根据权利要求1所述裂壶藻半连续阶段式发酵、絮凝板框干法制取DHA的方法，其特征在于：所述步骤a)中，培养基包括葡萄糖、酵母浸膏、谷氨酸钠、Na₂SO₄、KH₂PO₄、MgSO₄、VB₁、VB₆、VB₁₂。

4.根据权利要求1所述裂壶藻半连续阶段式发酵、絮凝板框干法制取DHA的方法，其特征在于：所述步骤a)中，发酵条件为在：通气量为1∶0.2～1∶0.8VVM；发酵初始时pH控制在6.5～7.0，发酵后期pH维持在7.0～7.5；在发酵过程中通过流加补糖将培养基中的还原糖浓度控制在4.0～5.0％；在发酵进入稳定期前控制温度为28～30℃，在进入稳定期后控制温度为26～28℃。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：在培养基中还原糖浓度在1.0％～1.5％时补充碳源。

6.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于：一级扩大培养的接种量为10％，二级扩大培养的接种量为20％，上罐接种量为25％。发酵完毕后，移种发酵罐I实际装液量的70％的发酵液到另一发酵罐，发酵24～48小时放罐。原发酵罐继续补充移种量等量的营养液继续发酵36～40小时，移种发酵罐I实际装液量的70％发酵液至发酵罐I-2中，然后继续在发酵罐I-2中发酵24～48小时，放罐。

7.根据权利要求1所述裂壶藻半连续阶段式发酵、絮凝板框干法制取DHA的方法，其特征在于：所述步骤b)中，絮凝剂为聚丙烯酰胺，添加量为发酵液质量的2‰～4‰，絮凝剂的配制浓度为15％。

8.根据权利要求1所述裂壶藻半连续阶段式发酵、絮凝板框干法制取DHA的方法，其特征在于：所述步骤c)中，破碎造粒的目数为100～150目，快速闪蒸得到的DHA微藻粉的水分控制在5％以下。