[发明专利]一种从小叶榕叶中提取异牡荆苷的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种从小叶榕叶中提取异牡荆苷的方法，具体涉及一种应用闪提技术与酶解-超声波辅助提取相结合提取异牡荆苷的方法，属于天然产物分离领域。

背景技术

小叶榕叶，又名小榕叶、落地金钱，来源于桑科榕属植物榕树的叶。小叶榕叶为民间常用中草药，其味淡、性凉，具有清热发表、解毒消肿、去湿止痛的功效。用于治疗哮喘和慢性支气管炎，在治疗心血管疾病、抗炎、抑菌等方面也都有显著的效果。其中主要含黄酮、三萜类和甾体化合物等化学成分，黄酮类成分以异牡荆苷为主。异牡荆苷，黄色状干粉，熔点228℃，不溶于水，溶于乙醇、甲醇、乙酸乙酯、氯仿等有机溶剂，属于碳苷黄酮，结构稳定，不易降解，并具有抗氧化、抗菌等活性。

目前关于提取异牡荆苷的方法主要是传统的浸渍法、渗漉法、回流提取法等，这些提取法均存在诸多不足，如杂质多，提取时间长，提取率低，溶剂消耗和残留大，成本高等。专利CN1289470C“白花败酱草中几种高纯度药用物质的快速制备方法”，采用乙醇提取，有机溶剂萃取、高效逆流色谱分离纯化等步骤，该方法提取时间长、有机溶剂用量大，并受到仪器设备的制约，成本高，不适合大规模生产。

发明内容

本发明的目的在于提供一种快速、高效的提取高纯度异牡荆苷的方法，该方法具有操作简单、反应条件温和、无毒性、对环境友好的优点，易于实现工业化生产。

本发明包括以下步骤：

a.将新鲜或干燥的小叶榕叶放入容器中，加入5~10倍的70~80%的乙醇，置于中药提取器上将小叶榕叶破碎提取5~10min；

b.取出，醋酸/醋酸钠调PH值至4.0~5.5，加入1~2%的纤维素酶，置于超声波装置中，于250~400W 、40~60℃下酶解40~60min；

c.过滤，滤液加碱中和至PH7.0，大孔吸附树脂纯化，8~10BV的40~50%的乙醇洗脱，洗脱液减压浓缩，得粗品； 

d.乙醇重结晶2次，得到高纯度的异牡荆苷。

步骤c中所述的碱为氢氧化钠、氢氧化钾或碳酸钠。

步骤c中所述的大孔吸附树脂型号为AB-8、D-140、ADS-5等。

本发明的优点在于：应用闪提技术对植物进行破碎，使物料高速粉碎至适当粒度，同时伴有高速搅拌、振动等外力，充分提高了提取效率；再结合纤维素酶酶解植物的细胞壁，使细胞破碎，在超声作用下，加速有效成分的溶出，从而提高了提取的速度和产率。本发明具有操作简单、周期短、产品得率高、纯度高的优点，可实现大规模的产业化生产。

下面将结合具体实施方式对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1：

将1000g新鲜或干燥的小叶榕叶放入容器中，加入5倍的80%的乙醇，置于中药提取器上将小叶榕叶破碎提取5min，取出，醋酸/醋酸钠调PH值至4.0，加入1%的纤维素酶，置于超声波装置中，于250W 、40℃下酶解40min，过滤，滤液加氢氧化钠中和至PH7.0，AB-8大孔吸附树脂纯化，8BV的50%的乙醇洗脱，洗脱液减压浓缩，甲醇重结晶2次，得到5.3g异牡荆苷，经HPLC检测，纯度为92.3%。

实施例2：

将1000g新鲜或干燥的小叶榕叶放入容器中，加入8倍的75%的乙醇，置于中药提取器上将小叶榕叶破碎提取8min，取出，醋酸/醋酸钠调PH值至5.0，加入1.5%的纤维素酶，置于超声波装置中，于300W 、50℃下酶解50min，过滤，滤液加氢氧化钠中和至PH7.0，ADS-5大孔吸附树脂纯化，10BV的40%的乙醇洗脱，洗脱液减压浓缩，甲醇重结晶2次，得到6.2g异牡荆苷，经HPLC检测，纯度为95.6%。

实施例3：

将1000g新鲜或干燥的小叶榕叶放入容器中，加入10倍的70%的乙醇，置于中药提取器上将小叶榕叶破碎提取10min，取出，醋酸/醋酸钠调PH值至5.5，加入2%的纤维素酶，置于超声波装置中，于400W 、60℃下酶解60min，过滤，滤液加氢氧化钠中和至PH7.0，AB-8大孔吸附树脂纯化，9BV的45%的乙醇洗脱，洗脱液减压浓缩，甲醇重结晶2次，得到5.8g异牡荆苷，经HPLC检测，纯度为93.8%。