[发明专利]一种多西他赛原料中有关物质的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种有关物质的检测方法，特别涉及一种多西他赛原料中有关物质的检测方法。

背景技术

多西他赛(Docetaxel)也叫多西紫衫醇：属于紫杉类化合物抗肿瘤药，作用机制是加强微管蛋白聚合作用和抑制微管解聚作用，导致形成稳定的非功能性微管束，因而破坏肿瘤细胞的有丝分裂。其化学结构式如下：

众所周知，药物纯度对病人的影响是非常大的。注射药物不纯是引起药物不良反应(如过敏、药物热等)的主要原因。口服药物不纯，可能增加不良反应的发生率，如恶心、呕吐、腹痛、腹泻等。同时，可能影响的是药物的吸收，从而影响药物疗效。因此，药物纯度的检测方法就显的尤为重要。

目前，对于多西他赛原料中相关物质的检测，美国药典36版，英国药典2013版、欧洲药典7.8版均收载了多西他赛原料的有关物质检测方法。均采用高效液相色谱法，采用水和乙腈进行梯度洗脱，柱温45℃，采集时间50min，检测波长232nm，流速为1.2mL/min。该方法采集时间较长，主峰出峰时间晚，主峰出峰后基线漂移，且有关物质出峰过于集中，不利于样品分析。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中所存在的上述不足，提供一种多西他赛原料中有关物质的检测方法，该检测方法能检测出更多杂质，杂质峰之间分离效果好，灵敏度、准确度高。杂质峰形对称性好，采集时间短等优点。

为了达到上述目的，具体技术方案如下：

一种多西他赛原料中有关物质的检测方法，采用反相高效液相色谱法，用有机溶剂和酸的水溶液为流动相A和流动相B在十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱进行梯度洗脱，流速为1.0-1.4mL/min，柱温35-45℃，样品的检测波长为232nm；选用35-45℃的柱温。

所述的流动相A为乙腈、水、乙酸三者的混合溶剂，其中，乙腈的体积百分比分别为40％-50％，乙酸的体积百分比为0.01-0.1％，余下为水；所述的流动相B为乙腈、水、乙酸三者的混合溶剂，其中个，乙腈的体积百分比为70％-75％，乙酸的体积百分比为0.01-0.1％的溶液，余下为水。本发明的流动相中加入乙酸，可以改善峰形及分离效果。

所述的以流动相A和流动相B进行梯度洗脱，时间(min)/流动相A(v％)：0/100；20/100；25/0；30/0；35/100；40/100。本发明选用的流动相条件，采集时间短，杂质峰和主峰分离效果好，基线平稳，对杂质测定无干扰。

优选的，所述的检测方法，采用反相高效液相色谱法，用有机溶剂和酸的水溶液为以流动相A和流动相B在十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱进行梯度洗脱，，流速为1.2mL/min，柱温40℃，样品的检测波长为232nm；

所述的流动相A为乙腈、水、乙酸三者的混合溶剂，其中，乙腈的体积百分比为45％，乙酸的体积百分比为0.05％，余下为水；；所述的流动相B为乙腈、水、乙酸三者的混合溶剂，其中，乙腈的体积百分比为70％，乙酸的体积百分比为0.05％，余下为水；

所述的以流动相A和流动相B进行梯度洗脱，时间(min)/流动相A(v％)：0/100；20/100；25/0；30/0；35/100；40/100。本发明优选的实验条件，主峰保留时间在10min左右，有利于杂质峰的检出与分离，溶剂峰对杂质测定无干扰，采集时间短。

所述的检测方法，所述的十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱填料的颗粒度为3.5μm或5μm，规格为150mm×4.6mm。

所述的检测方法，采集时间为40min。采集时间控制在40min，因为前20min的流动相中，有机溶剂比例少，有利于水溶性杂质的分离，但是不能保证脂溶性难洗脱的杂质能够检出。为了能够检出脂溶性难洗脱的杂质，随着洗脱时间增加，在25min后增加流动相中有机溶剂比例，进行洗脱。

所述的检测方法，所述的样品为1.0mg/mL的多西他赛溶液，其中溶剂含体积百分比5％的无水乙醇，体积百分比50％的乙腈，体积百分比0.05％的乙酸，余下为水。配制样品时，溶剂中添加乙酸，是为了让溶剂和流动相pH值接近，这样多西他赛不会因环境pH改变，而出现溶解性改变，甚至出现析出现象，影响检测结果。

所述的检测方法，量取所述的多西他赛溶液10μL，进行测定。

与现有技术相比，本发明的有益效果：

(1)本发明能够检测出更多的杂质，灵敏度高，采集时间较短。

(2)本发明中的流动相配制简单易操作，流动相中加入乙酸，能够改善峰形及分离效果。