[发明专利]一种用于分辨3种水产源气单胞菌复合群的检测试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及一种检测试剂盒，更具体的说是一种用于分辨嗜水气单胞菌复合群、温和气单胞菌复合群、豚鼠气单胞菌复合群3种常见水产源气单胞菌复合群的检测试剂盒。 

背景技术

气单胞菌属于气单胞菌科，广泛分布在水环境，也常在人体、水产动物和食物中检出。水产动物源气单胞菌分成3个复合群，包括嗜水气单胞菌复合群、温和气单胞菌复合群、豚鼠气单胞菌复合群，主要有嗜水气单胞菌、温和气单胞菌、维氏气单胞菌、豚鼠气单胞菌等，同时也是常见的人鱼共患病原菌，能引起人的食物中毒、腹泻、败血症等。气单胞菌具有广泛的致病性，在高温季节，容易单独或者混合感染包括鱼虾类、贝类、爬行两栖类等多种水产动物，是水产养殖中一种危害性较高的病原菌，容易引起水生动物多种细菌病的暴发，且危害程度高于其它细菌性疾病，成为我国淡水水产养殖业发展的主要威胁(唐江芳，气单胞菌及其在水产中的危害，2007)。而临床上的盲目用药，使病原菌在大范围药物选择压力下，渐渐保留了气单胞菌耐药菌株，甚至是多重耐药菌株，致使抗生素疗效下降(蔡丽娟，等，水产致病性嗜水气单胞菌耐药性比较与分析，水产科学，2011)。这不仅导致药物对水生动物疾病的防控能力大大减弱，同时也严重影响水产动物源食品的质量安全，还存在将耐药性传播给人类致病菌的潜在风险。因此，监测养殖动物和养殖水体中不同气单胞菌复合群的存在及其耐药性是防治相关水产动物疾病和保证食品安全的重要措施，而如何高效简便的分辨出水产源气单胞菌复合群是目前最需解决的问题。 

目前分辨出水产源气单胞菌复合群的技术有：1、通过普通培养基培养纯化单菌落后利用细菌快速自动鉴定系统进行鉴定分辨，该法需要昂贵的仪器设备和技术熟练的操作人员；2、通过普通培养基培养纯化单菌落后利用核酸的检测技术，包括DNA和PCR技术(聚合酶链式反应技术)，虽然具有快速、简洁和灵敏的特点，但该法需要昂贵的仪器设备和技术熟练的操作人员；3、经典的生理生化鉴定方法，该法不仅繁琐、耗时、且要求操作人员有良好的专业素质；4、目前也有些商品化的气单胞菌培养基，如RS培养基、AHM培养基和APM培养基等，但分离率和准确率不高(凌红丽，等，嗜水气单胞菌选择性培养基鉴别效果的比较，1998)。 

发明内容

针对上述不足，本发明的目的是提供了一种同时筛选嗜水气单胞菌复合群、温和气单胞菌复合群、豚鼠气单胞菌复合群3种常见水产源气单胞菌复合群且成本低，准确率高的试剂盒。 

为此，本发明提供的技术方案是这样的：该用于分辨3种水产源气单胞菌复合群的检测试剂盒，所述的试剂盒由下述鉴定瓶和试剂组成：1)试剂A-无菌水；2)鉴定瓶1-无盐碱性蛋白胨水；3)鉴定瓶2-含氨苄西林的RS培养基；4)鉴定瓶3-胰蛋白胨大豆培养基；5)鉴定瓶4-阿拉伯糖培养基；6)鉴定瓶5-七叶苷培养基；7)鉴定瓶6-葡萄糖产气培养基；8)鉴定瓶7-氧化酶试纸。 

上述的用于分辨3种水产源气单胞菌复合群的检测试剂盒，所述的水产源气单胞菌复合群为嗜水气单胞菌复合群、温和气单胞菌复合群和豚鼠气单胞菌复合群。 

进一步的，上述的用于分辨3种水产源气单胞菌复合群的检测试剂盒，所述的无盐碱性蛋白胨水由下述质量百分比的组分构成：蛋白胨1.9-2.1％，硝酸钾0.0095-0.015％，结晶碳酸钠0.015-0.025％，余量为水；pH8.2-8.5。 

进一步的，上述的用于分辨3种水产源气单胞菌复合群的检测试剂盒，所述的含氨苄西林的RS培养基由下述质量百分比的组分制成：L-盐酸鸟氨酸0.60-0.70％，L-盐酸赖氨酸0.4-0.6％，L-盐酸半胱氨酸0.02-0.04％，麦芽糖0.30-0.40％，硫代硫酸钠0.60-0.75％，枸橼酸铁胺0.07-0.09％，脱氧胆酸钠0.09-0.11％，酵母膏0.25-0.35％，氯化钠0.4-0.6％，溴麝香草酚蓝0.002-0.004％，新生霉素0.0004-0.0006％，琼脂1.2-1.8％，氨苄西林0.0001％，余量为水；pH6.8-7.2。 

进一步的，上述的用于分辨3种水产源气单胞菌复合群的检测试剂盒，所述的胰蛋白胨大豆培养基由下述质量百分比的组分构成：胰蛋白胨1.3-1.7％，大豆蛋白胨0.4-0.6％，氯化钠0.4-0.6％，琼脂1.2-1.7％，余量为水；pH7.2-7.6。