[发明专利]激光阵列编码和光诱导的细胞分离方法

权利要求书

1.一种激光阵列编码和光诱导的细胞分离方法，其特征在于：具体步骤为1）利用目标细胞的不同特性，对部分靶细胞进行荧光标记；

2）微流控芯片（7）包括集成在微流控芯片（7）上的细胞捕获微孔阵列阱（7.9）；其中细胞捕获微孔阵列阱（7.9）分别与集成在微流控芯片（7）上的样本入口（7.2）、缓冲液入口I（7.1）、缓冲液入口II（7.3）、缓冲液入口                                                （7.4）、缓冲液入口（7.5）、样本出口I（7.6）、样本出口II（7.8）和废液出口（7.7）连接；利用微流控芯片（7）上的细胞捕获阱将细胞捕获，混合细胞样品从微流控芯片中的样本入口（7.2）进入，混合细胞流经细胞捕获阱上方时陷落进入细胞捕获阱，进样结束后，将缓冲液入口（7.1）、缓冲液入口II（7.3）、缓冲液入口（7.4）和缓冲液入口（7.5）同时进缓冲液，将未被捕获的细胞经样本出口（7.8）收集； 

3）目标图像获取，运用高速CCD成像系统（9），使用激光发生器（3）对细胞进行照射，调节使用三维微动载物平台和显微放大成像平台调节至摄到细胞捕获微型阵列阱（7.9）区域及荧光显示的细胞图片；

4）随后进行目标图像处理，将用于微型阵列阱中目标细胞的检测与识别；

5）激光阵列编码和光诱导的细胞分离，所述的细胞捕获微孔阵列阱（7.9）包括若干细胞捕获阱（14），细胞捕获阱（14）底部设有激光基底加热区（17），激光基底加热区（17）下侧设有激光开关（18）；控制激光开关（18），从而控制是否在光纤对应的阱中产生气泡，对应光纤的捕获阱产生气泡，细胞被顶起，然后将缓冲液入口（7.1）、缓冲液入口II（7.3）、缓冲液入口（7.4）和缓冲液入口（7.5）同时进缓冲液将目标细胞通过样本出口（7.6）收集，之后将光开关全部打开，将死细胞顶起，通过样本出口（7.8）收集。

2.根据权利要求1所述的激光阵列编码和光诱导的细胞分离方法，其特征在于：所述的第三步中，激光发生器（3）选用蓝色激发光，波长488nm。

3.根据权利要求1所述的激光阵列编码和光诱导的细胞分离方法，其特征在于：所述第四步， 检测和识别的过程如下：

首先对图片进行分块处理，将栅格区域图片分成4x4的16个小区域，每个图片的宽度和高度为大图的1/4，获得每幅图像的4X4阵列位置信息，并记录二进制的位置信息；

每个小区域中有一个细胞，细胞有两种，一种为黄绿色，一种为红色，对小区域的每个像素进行处理，若图像显示为黄绿色，则RGB值中G的值明显大于R和B的值，对小区域100x100区域的10000个像素进行挨个判断，统计出其中每个像素RGB值中G的值明显大于R和G的个数N_i，其中i=1,2,3…… 16，N_i 为各个小区域判断为黄绿色的像素个数；

3）计算出每个小区域中绿色像素个数占总的像素个数的百分比M=N_i/10000*100%，若百分比M大于50%，则认为该区域中的细胞为黄绿色细胞，并记录黄绿色区域的位置信息。