[发明专利]一种来源火龙果的多肽及其应用、制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及火龙果再加工领域，具体涉及一种多肽及其从火龙果中提取植物性白蛋白的方法

背景技术

火龙果是一种低能量的水果，富含水溶性膳食纤维，具有减肥、降低胆固醇、预防便秘、大肠癌等功效，还有丰富的纤维，能够预防便秘。火龙果中含有一般蔬果中较少有的植物性白蛋白，这种白蛋白会与人体内的重金属离子结合而起到解毒的作用。它富含抗氧化剂维生素C，能美白皮肤防黑斑。除此之外，火龙果中铁的含量也非常丰富。

它含有一般植物少有的植物性白蛋白及花青素、丰富的维生素和水溶性膳食纤维。白蛋白是具黏性、胶质性的物质，对重金属中毒具有解毒的功效。由于工业废水、废弃物处理回收未获重视，以致各种水资源受到了严重重金属污染，除了直接饮用水中毒外，人类摄人食品重金属含量超标也易中毒。而白蛋白在人体内遇到重金属离子时，会自动与重金属离子结合，由排泄系统排除体外，起到解毒的作用。因此，食用含白蛋白丰富的火龙果，可避免重金属离子的吸收而中毒。白蛋白对胃壁还有保护作用。而且火龙果花、果、茎中的白蛋白十分优良，稳定性极佳。

发明内容

发明目的

本发明提供一种来源于火龙果的多肽，该多肽是从白蛋白中分离得到，该多肽具有增加免疫力，促进胃肠蠕动，有望开发成保健品或药物。

技术方案

一种多肽ATCRTPTTLKLGGEERRRADTTGKLAA。

一种多肽在制备抗动脉硬化药物中的应用。

本发明提供一种制备火龙果白蛋白，及纯化工艺：

将火龙果的皮和果肉分离，然后用滤网过滤果肉溶液中的果籽。果籽用低温粉碎器破碎，然后提取总蛋白。在低温条件下，利用金属螯合原理，从总蛋白中提取白蛋白，然后纯化。

具体方法如下：

1、在环境温度为16℃的空间进行。在将火龙果剥皮之后，果肉用低温搅拌器破碎，按照1:10加水；将火龙果脱皮，火龙果皮用来提取花青素。火龙果的果肉捣烂，然后用滤网将火龙果的籽从果肉中分离出来。去籽的果肉，拿去做果浆，然后生产火龙果饮料。火龙果的籽，在低温下破碎，分离，加水提取总蛋白。

2、总蛋白溶液用4倍体积乙酸-乙酸钠缓冲液稀释，0.1mol/L NaOH调整蛋白稀释液pH至4.5。

3、室温下用电磁搅拌器边搅拌边缓慢滴加辛酸(加入量为1L蛋白稀释液加25ml)，滴加完后继续搅拌30min。

4、离心(10000转/分，20分钟),收集上清液，弃去沉淀，上清液用滤纸过滤除去悬浮物，量体积。

5、按照10％体积加入10×磷酸盐-NaCl缓冲液，用5mol/LNaOH调pH至7.4。

6、上清液4℃预冷10min，测量溶液总体积，在4℃按277g/L缓慢加入硫酸铵粉末(终浓度达到45％饱和度)，边加边搅拌，加完后继续搅拌30min。

7、离心(5000转/分，15分钟),弃去上清液，收集沉淀。

8、沉淀用少量透析液溶解(为原蛋白体积的1/10)，透析并更换两次透析液。

9、透析后的蛋白溶液离心(5000转/分，20分钟),上清液于-20℃保存。

10、白蛋白从蛋白中的分离-固定金属亲和色谱制备；利用磷酸盐与金属离子柱中的金属离子螯合，然后与总蛋白中的白蛋白结合，然后利用洗脱液将白蛋白洗脱，(离子柱可以重复使用)。洗脱后的白蛋白进行纯化。半制备RP-HPLC分离纯化，乙腈:水(20:80)得到的产物冻干后，即为多肽。应用上述方法提取的多肽，经过质谱鉴定，序列为ATCRTPTTLKLGGEERRRADTTGKLAA，该序列为全新序列。

有益效果：

1、本发明首次采用新提取工艺获得火龙果的提取白蛋白，在白蛋白混合物中分离得到多肽。该多肽具有抑制动脉硬化功能。拓宽了火龙果深加工，为进一步开发保健品或药品提供原料。

2、丰产的火龙果每亩产量在1吨-2吨之间，有20％左右为小果和次果，这些次果，销路很差，如何解决这些次果的销路，提高产品附加值，一直困扰果农。如果对这些次果，首先提取植物性白蛋白，然后分离果肉和果皮。果皮可以提取花青素和天然色素，果肉可以制备果酱和饮料。这样综合利用，将大大提高红心火龙果的价值，增加农民收入。

具体实施方式

实施例1