[发明专利]一种靶向性纳米级脂质体超声造影剂及其制备方法

说明书

一种靶向性纳米级脂质体超声造影剂，包括蛋黄卵磷脂、二硬脂酰磷脂酰胆碱、棕榈酸和胆固醇，其中蛋黄卵磷脂、二硬脂酰磷脂酰胆碱、棕榈酸和胆固醇的摩尔比为：10～25∶50～70∶1～15∶5～25，优选为15～20∶55～65∶5～10∶10～20，更优选为17∶60∶8∶15。其通过先制备纳米级脂质体超声造影剂，再采用异型双功能交联剂交联法进行IL‑8单克隆抗体与自制纳米级脂质体的偶联，从而制备得出靶向性纳米级脂质体超声造影剂。为靶向性纳米级脂质体造影技术早期诊断和治疗与IL‑8高表达相关疾病提供方法学和物质基础。

技术领域

本发明属于纳米材料制备领域，具体涉及一种靶向性纳米级脂质体超声造影剂及其制备方法。

背景技术

近年来随着超声造影剂制作工艺的优化和分子化学的发展，超声造影剂的制备已经走入了一个多样化的时代。就目前制备超声造影剂的膜材料来说，可分为非离子表面活性剂类、蛋白质类、脂质类和高分子多聚体类，其中脂质类是目前较为常用的膜材料，相国内外的研究已经证实脂质是一类稳定的膜材料，而且脂膜的弹性好、变形性好，一方面比起白蛋白膜来说，具有更好的稳定性及回声特性；另一方面在声场作用下，微泡能够有规律的膨大和缩小，此外，在超声辐射力的驱动下微泡在血液中的流动缓慢、相互吸引并向管壁移动，可使更多大于管壁孔径、具有更大回声特性的微泡透过血管壁。

根据造影剂的大小可将造影剂分为微米级造影剂和纳米级造影剂，一般来说，我们通过激光扫描法、电子显微镜法、库尔特粒度分析法来分析造影剂微粒的大小。微米级造影剂因其内径较大，不能透过血管，属于血池显像，限制了其对血管外疾病的诊断和治疗。纳米级造影剂是指颗粒直径在纳米尺度范围内的造影剂，粒径小于1000nm(1μm)。纳米级造影剂较常规造影剂有极强的穿透力，可以通过血管内皮间隙进入组织间隙，使血管外靶组织显像成为可能，从而超越常规造影剂仅能发生血池内显像的局限性，推动超声分子显像与靶向治疗向血管外领域拓展。Oeffinger等证实纳米级微泡超声造影剂用于超声造影增强是完全可行的。此外，物质的尺寸减少到纳米级后，分子特性会发生很大改变，表现出许多特有的性质，如表面积大、表面活性中心多、表面反应活性高、强烈的吸附能力以及不易受体内和细胞内各种酶的降解等，这都为其在生物医学领域的研究应用中开辟了新的道路，但因其在体内的稳定性、反射性及封包率等问题，目前仍在实验阶段。

脂质体作为造影剂时，经静脉注射进入人体后，易先被富含网状内皮细胞的组织，如肝、脾及骨髓等所摄取，即脂质体具有一定的靶向性，但这属于被动靶向，其特异性和靶向性均较差，无法满足靶向性超声造影技术的要求。通常，我们会通过对脂质体进行一些特殊处理，在其表面装配具有靶向性的配体(如单克隆抗体)来实现的脂质体造影剂在体内的高特异性和靶向性。本发明用不同脂类作为膜材料，使用冷冻干燥-超声法成功制备了纳米级脂质体超声造影剂，并使用异型双功能交联剂交联法成功将IL-8单克隆抗体偶联于自制纳米级脂质体超声造影剂上，为靶向性纳米级脂质体造影技术早期诊断和治疗与IL-8高表达相关疾病提供方法学和物质基础。

发明内容

本发明旨在提供一种可以靶向显影，用于疾病早起诊断和治疗的纳米级超声造影剂，同时还提供了其制备方法。

本发明通过以下技术方案实现：

一种靶向性纳米级脂质体超声造影剂，包括蛋黄卵磷脂(EPC)、二硬脂酰磷脂酰胆碱(DSPC)、棕榈酸和胆固醇(CH)，其中蛋黄卵磷脂、二硬脂酰磷脂酰胆碱、棕榈酸和胆固醇的摩尔比为：10～25∶50～70∶1～15∶5～25，优选的，蛋黄卵磷脂、二硬脂酰磷脂酰胆碱、棕榈酸和胆固醇的摩尔比为：15～20∶55～65∶5～10∶10～20，最优选的蛋黄卵磷脂、二硬脂酰磷脂酰胆碱、棕榈酸和胆固醇的摩尔比为17∶60∶8∶15。

一种靶向性纳米级脂质体超声造影剂的制备方法，包括以下步骤：1)纳米级脂质体超声造影剂，2)靶向性纳米级脂质体超声造影剂的制备。

所述的步骤1具体为：