[发明专利]在激光扫描共聚焦显微镜上的单重态氧显微成像方法

权利要求书

1.一种在激光扫描共聚焦显微镜上的单重态氧显微成像方法，其特征在于：激光扫描共聚焦显微镜物镜的两端，一端为面向检测样品的样品端，另一端为激光入口端，于物镜激光入口端的前方放置一块二向分色镜(7)，该二向分色镜能够将经物镜收集后所形成的单重态氧红外发光光束与样品的其它波段发光光束分成两束光，其中单重态氧红外发光光束不经过激光扫描共聚焦显微镜的扫描头而到达激光扫描共聚焦显微镜的其中一个光探测器(D1)，转化成电信号被信号记录装置(5)记录下来而获得样品发出的单重态氧红外发光强度和发光寿命的显微成像。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，二向分色镜在1240nm－1340nm波段的反射率为45％－99.99％，相应的透过率则为0.01％－55％。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述单重态氧是指处于第一电子激发态的氧气分子O₂(a ¹Δ_g)；

所述单重态氧红外发光是指单重态氧跃迁到基态O₂(X³Σ_g^－)时发出的波长范围为1240nm－1340nm的红外光。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，样品本身就是单重态氧光敏剂，或者检测信号前往样品中加入单重态氧光敏剂，单重态氧光敏剂具体为C₆₀、C₇₀、苯、卟啉中的一种或两种以上，单重态氧光敏剂在样品中的质量分数为0.01ppm－100％。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，激光扫描共聚焦显微镜所用的激光器是300nm－780nm波段、脉冲重复频率为1kHz－100MHz、脉冲宽度为10ps－10ns的皮秒脉冲激光器(3)。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，二向分色镜(7)设置于激光入口端正前方，与物镜的焦平面的夹角在30°－60°之间；二向分色镜(7)为方形或圆形，其边长或直径限定在5mm－75mm之间，厚度在0.5mm－3mm之间。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，二向分色镜(7)与物镜的焦平面的夹角优选为45°。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：光探测器为光电倍增管、光电二极管中的一种或二种，其中光探测器(D1)为红外光电倍增管。