[发明专利]一种油基钻屑降解菌及其制备和应用方法

说明书

本发明公开一种油基钻屑降解菌及其制备和应用方法，属含油固体废弃物微生物处理技术领域。油基钻屑降解菌由复合菌群构建组成，通过对石油污染土壤中的细菌进行富集、分离、纯化和筛选，纯化出了3株降解单菌，然后通过发酵培养制备，该油基钻屑降解菌含有拉丁文学名为Pseudomonas Aeruginosa的铜绿假单胞菌、拉丁文学名为Kocuria kristinae的克氏微球菌和拉丁文学名为Acinetobacter Calcoaceticus的乙酸钙不动杆菌，用于油基钻屑中的石油组分降解，具有除油效率高、处理周期短的显著优势。对于初始油含量小于5%的油基钻屑，在处理5～30d，油含量可降至1%以下，油去除率达80%以上。用于含油土壤、含油污泥的生物修复，也具有良好的应用前景。

技术领域

本发明涉及一种油基钻屑降解菌及其制备和应用方法，属含油固体废弃物微生物处理技术领域。

背景技术

含油固体废弃物中的油基钻屑已被列入国家危险废物，因其具有体系异常稳定，污染物种类复杂、含油量高等特点，处理难度非常大。在油基钻屑处理技术中，生物处理技术因具有安全、经济、高效、无二次污染等优点，已成为现场油基钻屑安全处理和处置的重要手段，特别是对机械装置无法清除的孔隙油和薄油层，同时又限制使用化学药剂时，运用生物处理技术可显出更大的优越性。现有的油基钻屑微生物处理方法是采用的厌氧堆腐-好氧降解-植物种植工艺，处理周期一般在180d，甚至360d以上，总石油烃(THP)含量可降至1％以下，存在着短期内降解率不高，处理周期长的缺陷。

发明内容

本发明目的是克服生物降解菌短期内降解率不高、处理周期长的缺陷，提供一种油基钻屑降解菌。

本发明另一个目的是提供一种油基钻屑降解菌的制备方法。

本发明目的还包括提供上述油基钻屑降解菌的应用。

一种油基钻屑降解菌，由复合菌群构建组成，含有拉丁文学名为PseudomonasAeruginosa的铜绿假单胞菌、拉丁文学名为Kocuria kristinae的克氏微球菌和拉丁文学名为Acinetobacter Calcoaceticus的乙酸钙不动杆菌。

一种油基钻屑降解菌的制备方法，包括如下步骤：

1、在井场取石油污染土壤，对土壤中的细菌在LB培养基、中性环境、温度为30℃～40℃条件下进行富集培养，将富集培养后的细菌经分离、纯化和筛选，获得以下3株降解单菌：

铜绿假单胞菌，拉丁文学名Pseudomonas Aeruginosa；

克氏微球菌，拉丁文学名Kocuria kristinae；

乙酸钙不动杆菌，拉丁文学名Acinetobacter Calcoaceticus。

2、将步骤1所得3株降解单菌按照铜绿假单胞菌：克氏微球菌：乙酸钙不动杆菌1：(0.9～1.1)：(0.9～1.1)的体积比例进行混合，得到混合菌液。

3、将步骤2的混合菌液在工业培养基中进行发酵培养，发酵液经过滤、分离、干燥后，得到油基钻屑降解菌，命名为BSG。

所述的步骤3中的工业培养基，按质量/体积比计，由1％～2％的蛋白胨、0.8％～1.2％的葡萄糖、1.5％～2％的酵母膏、0.1％～0.15％的氯化钠、0.5％～0.7％的磷酸氢二钾、1％～2％的氯化镁、水组成。

所述的步骤3中的发酵培养的条件为：发酵温度33～37℃，接种量10％～20％v/v，搅拌速度100～150rpm，发酵时间24～48h，发酵过程中向培养基中通入空气，每分钟通入空气的气液体积比为1～1.5。

所述的步骤3中油基钻屑降解菌BSG的菌活数均为10⁹～10¹¹个/g。