[发明专利]一种灵敏度高的肌钙蛋白I检测试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及一种测定血清中肌钙蛋白I（Tn I）含量的试剂盒，属于临床体外检测技术领域。

背景技术

肌钙蛋白(Troponin,Tn)是组成横纹肌细丝的结构蛋白,其亚单位I、T、C组成复合物，在肌肉收缩和舒张过程中起重要作用。其中，心肌肌钙蛋I(CaldiaetroponinI,CTnI)经大量的研究，已被证实为心肌损伤最特异性、最敏感的血清标志物之一，正逐渐取代肌酸激酶MB同工酶(CK-MB)成为判断心肌损伤，特别是急性心肌梗塞(AMI)的“金标准”。因此，肌钙蛋白I目前已成为诊断心肌损伤的前提条件。

TnI是心肌细胞中的特有蛋白质。临床上其它非急性心肌梗死（AMI）也可由TnI释放，如不稳定心绞痛、充血性心衰，冠状动脉分流术造成的缺血性损伤。在急性心肌梗死时，血清心肌肌钙蛋白T(TnT)及心肌肌钙蛋白I(TnI)在2.7～4.9小时开始升高，5.8～29小时达到高峰值，83～168小时恢复正常。所以，血清心肌肌钙蛋白测定，有助于早期及中后期急性心肌梗死的诊断，尤其对于微小的、小灶性心肌梗死的诊断更有价值。不稳定型心绞痛、围手术期心肌损害及其他心肌损害等，心肌肌钙蛋白也均可增高。在急性心肌梗死后1～4天，血清中心肌肌钙蛋白I(TnI)浓度之比，可作为溶栓是否成功的指标之一。

AMI病人于发病后3～6小时升高，发病10～120小时内检测敏感性达100%，peaktime于发病后l0～48小时左右出现，可达参考值的30～40倍。出现峰值较晚或峰值较高的病人增高可持续2～3周。对于非Q波MI、亚急性MI或用CK-MB无法判断预后的病人更有意义。因此心肌肌钙蛋白I的检测对心肌损伤病的早期诊断和指导临床治疗有重大的意义。

目前市场上适用的肌钙蛋白I的检测方法有：ELISA法、放射免疫法、ELFA法、化学发光法，金标免疫法等，但分别收到检测线性范围小、操作复杂，稳定时间短、价格昂贵、只能定性分析，受主观因素影响大等原因受到了一定的局限。而目前市场上心肌肌钙蛋白I诊断试剂盒，在其性能及价格方面都有了较大的改善，并有全自动生化分析仪，形成了完整的检测系统，提高了心肌损伤的早期诊断效率。但是仍然存在低值灵敏度不够，阳性检测率相对较低的问题，使在检测时存在假阳性的问题，因此在检出率上还存在一定的局限。所以发明一种特异性好、灵敏度高的试剂盒具有非常重要的临床意义。

 

发明内容

 本发明的目的在于提供一种检测肌钙蛋白I的方法，在试剂R1中加入亚铁氰化钾，试剂R2中加入一定浓度的N-乙酰顺丁烯二酰亚胺，以克服现有技术的缺陷，显著提高试剂盒低值检测时的灵敏度及与‘金标准’化学发光相比阳性检测率的一致性。

本试剂盒包括体积比为3:1的试剂R1和试剂R2，其组成分别为：

试剂1（R1）：     

Hopes缓冲液                             PH 7.6

氯化钠                                     80～150mmol/L

曲拉通X-114                             1～10g/L

亚铁氰化钾                       1ug/L~2 ug/L

吡唑                                        0.1～1 g/L   ;

试剂2（R2）：

甘氨酸缓冲液                                     PH 7.6  

羊抗人TnI抗体包被胶乳颗粒                1～5mL/L 

N-乙酰顺丁烯二酰亚胺                         0.1～1 g/L

吡唑                                                  0.1～1 g/L 。

 制备方法：取各组分用缓冲溶液溶解达到规定浓度即可。

 本发明提供的试剂盒，与其灵敏度和一致性显著提高。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步的说明。

实施例1

1）本实施例所描述的肌钙蛋白I的检测试剂盒，包括试剂R1和试剂R2：

其R1的组成为：