[发明专利]一种检测多肿瘤相关“多肽-蛋白组合式标志物”的双抗体夹心试剂盒有效
| 申请号: | 201410418322.8 | 申请日: | 2014-08-22 | 
| 公开(公告)号: | CN104345154B | 公开(公告)日: | 2016-10-26 | 
| 发明(设计)人: | 魏开华;甄蓓;侯利平;孙云波;宋纯艳;杨保安;周婷婷;刘曙晨;郑俊杰 | 申请(专利权)人: | 北京蛋白质组研究中心;中国人民解放军军事医学科学院放射与辐射医学研究所 | 
| 主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68 | 
| 代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 赵青朵 | 
| 地址: | 102206 *** | 国省代码: | 北京;11 | 
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 检测 肿瘤 相关 多肽 蛋白 组合式 标志 抗体 夹心 试剂盒 | ||
1.一种检测胃癌、食管癌、肠癌、乳腺癌、肺癌、肝癌“多肽-蛋白组合式标志物”的双抗体夹心试剂盒,其特征在于,包括捕获抗体和检测抗体,所述捕获抗体与蛋白HKa特异性结合;所述检测抗体与多肽HKP15、多肽HKP09或蛋白HKa均特异性结合,
所述多肽HKP09的全长氨基酸序列如SEQ ID No.1所示;
所述多肽HKP15的全长氨基酸序列如SEQ ID No.2所示;
所述蛋白HKa的全长氨基酸序列如SEQ ID No.3所示。
2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述捕获抗体为单克隆抗体或多克隆抗体;所述检测抗体为单克隆抗体或多克隆抗体。
3.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述捕获抗体由保藏编号为CGMCC No.9332的单克隆细胞株2G6分泌;所述检测抗体由保藏编号为CGMCC No.9331的单克隆细胞株3D11分泌。
4.根据权利要求1~3任一项所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括HKa标准品、碳酸盐包被缓冲液、PBST洗涤缓冲液、卵清蛋白封闭剂、底物液、硫酸终止液和96孔酶标板。
5.如权利要求1~4任一项所述的试剂盒在制备胃癌、食管癌、肠癌、乳腺癌、肺癌、肝癌双抗体夹心检测产品中的应用。
6.权利要求1~4任一项所述的试剂盒的使用方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1:以捕获抗体捕获待测样品中的组合式标志物中的蛋白HKa;
步骤2:以检测抗体检测上述已捕获的蛋白HKa的表位多肽HKP09或多肽HKP15;
步骤3:根据检测值绘制标准曲线,获得待测样品中“多肽-蛋白组合式标志物”的含量。
7.根据权利要求6所述的使用方法,其特征在于,所述捕获抗体由保藏编号为CGMCC No.9332的单克隆细胞株2G6分泌;所述检测抗体由保藏编号为CGMCC No.9331的单克隆细胞株3D11分泌。
8.根据权利要求6或7所述的使用方法,其特征在于,所述试剂盒中的捕获抗体包被于固相载体;优选的,固相载体为酶标板。
9.根据权利要求6或7所述的使用方法,其特征在于,所述试剂盒中的检测抗体上含有标记物质;优选的,标记物质为辣根过氧化物酶HRP。
10.根据权利要求9所述的使用方法,其特征在于,所述捕获抗体的包被浓度为1000ng/mL;所述检测抗体的检测滴度为1:2000。
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