[发明专利]一种血小板保存液有效
申请号: | 201410410653.7 | 申请日: | 2014-08-19 |
公开(公告)号: | CN104222067A | 公开(公告)日: | 2014-12-24 |
发明(设计)人: | 王布强;刘丹 | 申请(专利权)人: | 江阴金悦达生物技术有限公司 |
主分类号: | A01N1/02 | 分类号: | A01N1/02 |
代理公司: | 无锡华源专利事务所(普通合伙) 32228 | 代理人: | 聂汉钦 |
地址: | 214400 江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 血小板 保存 | ||
技术领域
本发明涉及生物医学领域,尤其是涉及一种用于体外低温保存血小板的保存液。
背景技术
血小板是血液重要的组成成分,参与机体凝血过程,发挥正常的止血功能,防止损伤后血液丢失;同时,血小板也参与炎症、免疫及支持内皮完整性的功能。血小板在在4℃储存时,活性很快下降,6h后约有40%的活性,12h后仅有20%的活性。室温储存的血小板容易失去止血功能,室温相对较高,很难控制细菌的污染,由细菌污染血小板的输注而引起的败血症休克一直是一个严重的临床问题。如何保护血小板的活性、提高其在体外的存活率,如何延长血小板的保存期以及减少或杜绝细菌的污染等,是血小板保存面临的重要问题。
冷冻时细胞损伤的主要原因是在快速冷冻时,细胞内形成许多冰晶,冰晶作用于细胞膜并使细胞膜上形成小孔,使得细胞膜不可逆的丧失其半透性从而失去活性。玻璃化是保存生物材料最有效的方法,由液态向固态转化过程中没有相变热产生,也就没有晶体产生,在玻璃化状态下可以长期保持血细胞的功能与活性,抑制冰晶形成,可避免细胞内外溶质的浓缩给细胞造成损伤,达到保护细胞的目的。
DMSO不仅对血小板保存效果好,而且低浓度的DMSO对人体没有副作用以及制作方便,输注时不用洗涤;同时,DMSO还有具有一定的抑菌和抗血小板凝集作用,可明显防止微循环堵塞。因此探索血小板低温保存已成为一个非常有意义的课题。
发明内容
针对现有技术存在的上述问题,本申请人提供了一种血小板保存液。本保存液能够在低温下保持血小板的高生物活性,且本身的生物毒性小,对受体的损伤控制在最低范围内。
本发明的技术方案如下:
一种血小板保存液,制备方法为:
将二甲基亚砜即DMSO与新鲜注射用水配置成体积浓度为100~50%的溶液,然后搅拌均匀,加入药用炭;然后将所得溶液经钛棒过滤脱碳后,先经0.45um的微孔滤膜过滤,再经0.22um的微孔滤膜过滤,即得所述血小板保存液。
所述药用炭的用量为每1000ml血小板保存液中加入2~10g药用炭。
将所得血小板保存液在-14~-10℃下保存3~3.5h,然后在10~14℃下保存3~3.5h,如此反复循环1~3次,最后置于室温保存。
本发明有益的技术效果在于:
本发明使用药用炭是用来吸附去除DMSO和注射用水中的热源,以免热量破坏血小板的细胞结构。本发明对制备好的血小板保存液进行冷冻和融化处理,可以在微观形态上改变保存液的空间立体结构,使其在血小板细胞内部更好的发挥玻璃化作用。
具体实施方式
实施例1
本血小板保存液的制备方法为:
将二甲基亚砜即DMSO与新鲜注射用水配置成体积浓度为50%的溶液,然后搅拌均匀,加入药用炭;然后将所得溶液经钛棒过滤脱碳后,先经0.45um的微孔滤膜过滤,再经0.22um的微孔滤膜过滤,即得所述血小板保存液。其中药用炭的用量为为每1000ml血小板保存液中加入2g药用炭。
实施例2
本血小板保存液的制备方法为:
将二甲基亚砜即DMSO与新鲜注射用水配置成体积浓度为85%的溶液,然后搅拌均匀,加入药用炭;然后将所得溶液经钛棒过滤脱碳后,先经0.45um的微孔滤膜过滤,再经0.22um的微孔滤膜过滤,即得所述血小板保存液。其中药用炭的用量为为每1000ml血小板保存液中加入10g药用炭。
实施例3
将实施例1所得血小板保存液在-14℃下保存3h,然后在14℃下保存3h,如此反复循环1次,最后置于室温保存。
实施例4
将实施例1所得血小板保存液在-10℃下保存3.5h,然后在10℃下保存3.5h,如此反复循环3次,最后置于室温保存。
测试例:
将实施例1~4所得的血小板保存液分别与大鼠血小板按照表1的比例混合。表1中的单位为血小板保存液在血小板液体中的体积浓度。
表1
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