[发明专利]抗-间皮素抗体及其用途

说明书

本发明涉及抗‑间皮素抗体及其用途。本发明提供了特异于膜锚定的，40kDa间皮素多肽的重组抗原结合区和包含所述抗原结合区的抗体和功能片段，所述间皮素多肽在若干种肿瘤中过表达，例如胰腺和卵巢肿瘤，间皮瘤和肺癌细胞。相应地，这些抗体可用于治疗这些和其它病症和状况。本发明的抗体还可用于诊断领域，以及用于进一步研究间皮素在与癌症相关的病症进展中的作用。本发明还提供了编码前述抗体的核酸序列，包含其的载体，药物组合物和具有使用说明的试剂盒。

本申请为申请号为200880125390.8的分案申请，要求2007年11月26日的优先权。本发明提供了特异于膜锚定的，40kDa间皮素多肽的重组抗原结合区和包含所述抗原结合区的抗体和功能片段，所述间皮素多肽在若干种肿瘤中过表达，例如胰腺和卵巢肿瘤，间皮瘤和肺癌细胞。相应地，这些抗体可用于治疗这些和其它病症和状况。本发明的抗体还可用于诊断领域，以及用于进一步研究间皮素在与癌症相关的病症的进展中的作用。本发明还提供了编码前述抗体的核酸序列，包含其的载体，药物组合物和具有使用说明的试剂盒。

发明背景

基于抗体的治疗证明在治疗多种癌症，包括实体肿瘤中是非常有效的。例如，已经成功地用于治疗乳癌。成功的基于抗体的治疗的开发的中心是分离针对发现在肿瘤细胞上优先表达的细胞表面蛋白的抗体。间皮素前体多肽是糖磷脂酰肌醇(GPI)-锚定的，糖基化的细胞表面蛋白，其被蛋白水解裂解为30kDa的N-末端分泌的多肽和40kDa的C-末端多肽，后者主要以膜结合的，GPI-锚定的形式存在(Chang,K.and I.Pastan,Proc.Natl.Acad.Sci.U S A,(1996)93(1):136)，并且其在此命名为间皮素(mesothelin)。间皮素被某些肿瘤细胞优先表达，特别是间皮瘤细胞，胰腺肿瘤细胞和卵巢癌细胞，而其表达在正常组织中受限，使得它成为用于肿瘤治疗的理想靶标(Argani,P.et al.,Clin.Cancer Res.(2001)7(12):3862；Hassan,R.,et al.,Clin.Cancer Res.(2004)10(12Pt1):3937)。间皮素的功能是未知的，并且在间皮素基因表达缺陷的小鼠中没有观察到明显的生殖，血液学，或解剖学异常(Bera,T.K.and I.Pastan,Mol.Cell.Biol.(2000)20(8):2902)。

针对表达间皮素的癌细胞的基于抗体的，靶向的治疗已经被提出用于治疗肺，卵巢和胰腺癌。Mab K1是已被描述的针对膜结合间皮素多肽的第一个抗体(Chang,K.,etal.,Int.J.Cancer,(1992)50(3):373)。Mab K1通过免疫小鼠产生。由于该抗体的低亲合力和弱的内化速率，由与假单胞菌属外毒素A的化学修饰的截短形式相连的Mab K1组成免疫毒素被认为不适于临床开发(Hassan,R.,et al.,J.Immunother.(2000)23(4):473；Hassan,R.,et al.,Clin.Cancer Res.(2004)10(12Pt1):3937)。结果，开发了具有更高亲合力的单链抗体，包括SS1-(dsFv)-PE38，其显示了体外杀伤肿瘤细胞活性(Hassan,R.,etal.,Clin.Cancer Res.(2002)8(11):3520)以及在表达人类间皮素的肿瘤的鼠模型中的效力(Fan,D.,et al.,Mol.Cancer Ther.(2002)1(8):595)。这些数据证实了间皮素为用于多种癌症的免疫治疗的适合的靶标。然而，在临床实验中，SS1-(dsFv)-PE38是免疫原性的，阻止了对大多数患者的第二次给药。而且，SS1-(dsFv)-PE38已经显示出具有快速的血液清除并且已经报道了通过将该融合蛋白peg化来提高分子量的尝试(Filpula,D.,et al.,Bioconjugate Chem.(2007)18(3):773)。

MS-1,MS-2和MS-3是间皮素结合抗体，其由于它们的人类IgG1同种型在细胞表面引发免疫效应物活性，并且内化入间皮素表达细胞(WO 2006/099141 A2)。这些抗体之一，未缀合的IgG抗-间皮素抗体MOR Ab 009当前在用于治疗胰腺癌的治疗效果的临床实验中测试。