[发明专利]DNA分离纯化方法及其试剂盒有效

专利信息
申请号: 201410377744.5 申请日: 2014-08-01
公开(公告)号: CN104152436B 公开(公告)日: 2017-12-15
发明(设计)人: 徐小寅;蒋锦琴;隋梅花;徐万红 申请(专利权)人: 杭州新景生物试剂开发有限公司
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10
代理公司: 北京联瑞联丰知识产权代理事务所(普通合伙)11411 代理人: 武金花
地址: 310030 浙江省杭州*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: dna 分离 纯化 方法 及其 试剂盒
【权利要求书】:

1.一种DNA分离纯化方法,所述方法包括下列步骤:

(a)将裂解缓冲液加入到含有DNA的生物样本中以得到溶解的生物样本缓冲溶液;然后剧烈摇晃缓冲溶液;

(b)在剧烈摇晃后的所述缓冲溶液中加入沉淀液,之后剧烈摇晃,离心,形成蛋白质沉淀和上清液;

(c)将所述的上清液加入纯化柱中,洗脱DNA;

所述裂解缓冲液由1-2M氯化铵、1.5-2.5M硫氰酸铵、3.5-5M硫氰酸胍、0.1%-1%g/g磷酸二氢钠、1%-5%g/g磷酸氢二钠、1%-5%g/g十二烷基肌氨酸钠组成;

所述沉淀液由5%-10%g/g乙酸钠或乙酸钾、2%-10%g/g乙酸、10%-50%g/g硫酸锌、1-2M氯化钾以及1-2M盐酸胍组成;

所述裂解缓冲液、样本、沉淀液的体积比是3∶4∶3。

2.根据权利要求1所述的一种DNA分离纯化方法,其特征在于,所述生物样本为抗凝全血、唾液、细胞或细菌。

3.根据权利要求1所述的一种DNA分离纯化方法,其特征在于,所述纯化柱为含有二氧化硅介质的纯化柱。

4.一种DNA分离纯化试剂盒,包括上述权利要求1-3任一权利要求所述裂解缓冲液和沉淀液。

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