[发明专利]DNA分离纯化方法及其试剂盒有效
申请号: | 201410377744.5 | 申请日: | 2014-08-01 |
公开(公告)号: | CN104152436B | 公开(公告)日: | 2017-12-15 |
发明(设计)人: | 徐小寅;蒋锦琴;隋梅花;徐万红 | 申请(专利权)人: | 杭州新景生物试剂开发有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 北京联瑞联丰知识产权代理事务所(普通合伙)11411 | 代理人: | 武金花 |
地址: | 310030 浙江省杭州*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | dna 分离 纯化 方法 及其 试剂盒 | ||
1.一种DNA分离纯化方法,所述方法包括下列步骤:
(a)将裂解缓冲液加入到含有DNA的生物样本中以得到溶解的生物样本缓冲溶液;然后剧烈摇晃缓冲溶液;
(b)在剧烈摇晃后的所述缓冲溶液中加入沉淀液,之后剧烈摇晃,离心,形成蛋白质沉淀和上清液;
(c)将所述的上清液加入纯化柱中,洗脱DNA;
所述裂解缓冲液由1-2M氯化铵、1.5-2.5M硫氰酸铵、3.5-5M硫氰酸胍、0.1%-1%g/g磷酸二氢钠、1%-5%g/g磷酸氢二钠、1%-5%g/g十二烷基肌氨酸钠组成;
所述沉淀液由5%-10%g/g乙酸钠或乙酸钾、2%-10%g/g乙酸、10%-50%g/g硫酸锌、1-2M氯化钾以及1-2M盐酸胍组成;
所述裂解缓冲液、样本、沉淀液的体积比是3∶4∶3。
2.根据权利要求1所述的一种DNA分离纯化方法,其特征在于,所述生物样本为抗凝全血、唾液、细胞或细菌。
3.根据权利要求1所述的一种DNA分离纯化方法,其特征在于,所述纯化柱为含有二氧化硅介质的纯化柱。
4.一种DNA分离纯化试剂盒,包括上述权利要求1-3任一权利要求所述裂解缓冲液和沉淀液。
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