[发明专利]一种荧光恒温PCR扩增仪

说明书

技术领域:

本发明涉及一种荧光恒温PCR扩增仪,它由三个恒温水浴槽与一个测量筒组成,通过步进电机、滚珠丝杆、直线导轨引导样品管载盘中的样品在三个恒温水浴槽中实现PCR扩增反应,并在反应结束后在测量筒内进行荧光检测。它用于在生物体外扩增特定的DNA片段,同时利用荧光信号的变化检测PCR扩增反应最终产物的量的变化。

现有技术:

人们在体外实验中发现,DNA在高温时可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,配合生物学手段通过温度变化控制DNA的变性和复性,并且多次重复“变性解链-退火-合成延伸”的循环就能以几何级数大量扩增特定的基因。DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。在PCR技术的发展过程中,热稳定DNA聚合酶的发现以及温度循环的自动化大大简化了PCR扩增程序。荧光定量PCR扩增技术是在PCR反应体系中加入荧光基团,随着PCR反应的循环其荧光信号强度的积累,用于实时监测整个PCR进程。

目前,PCR扩增仪一般分为普通PCR扩增仪和荧光PCR扩增仪,按热传导介质不同分有气流式PCR扩增仪、金属模块式PCR扩增仪和水浴锅PCR扩增仪等,它们原理相似,但由于精确的温度控制是决定PCR反应能否成功的关键,因此在仪器结构、加热致冷方式和荧光检测方式等方面各不相同,以适应各种要求。PCR扩增仪的应用有:感染性、遗传性疾病及恶性肿瘤的分子诊断和研究、亲子鉴定、克隆基因等。

发明内容:

现有恒温式PCR扩增仪扩增结束后都不进行检测,其扩增反应的终点产物的检测是由其它设备实现,这对少量样品的PCR扩增就显得很麻烦,而恒温式PCR扩增仪具有价廉操作简便的特点,它比其它形式扩增仪更具控温精度高、变换温度快捷等优越性。非恒温式PCR扩增仪是在扩增结束后由该扩增仪对扩增反应的最终产物进行检测。目前荧光PCR扩增仪是采用超低温CCD成像,该系统一次对多点成像但灵敏度低精确度差,另有的采用光学系统逐个扫描样品并检测,但其扫描系统复杂造价昂贵,检测速度慢,因此对于大多数少量样品的扩增是很不经济的。本发明介绍一种荧光恒温PCR扩增仪,其特征是它由三个不同温度的恒温水浴槽和一个测量筒组成,通过步进电机Ⅰ、滚珠丝杆、直线导轨构成的机械臂引导样品管载盘移动,使样品管依序浸于三个恒温水浴槽中,样品在三个恒温水浴槽中实现不同阶段的PCR扩增反应,从而完成变性、复性和延伸三个过程,并在扩增反应结束后在测量筒进行荧光检测。样品管在每个槽中停留时间和在槽间的移动,都是通过控制器控制。该荧光恒温PCR扩增仪温度可调、恒温精度高、温度均匀,价格低廉,适用于基层实验室使用。