[发明专利]一株适合于糖蜜发酵生产高纯度L-乳酸的德式乳酸杆菌及发酵方法和应用有效
申请号: | 201410376025.1 | 申请日: | 2014-08-01 |
公开(公告)号: | CN104178438A | 公开(公告)日: | 2014-12-03 |
发明(设计)人: | 刘锋;明晓东;雷滟敏 | 申请(专利权)人: | 湖北艾尔生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12P7/56;C12R1/225 |
代理公司: | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人: | 王敏锋 |
地址: | 441300 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 适合于 糖蜜 发酵 生产 纯度 乳酸 杆菌 方法 应用 | ||
1.一种德式乳酸杆菌,其特征在于:德式乳酸杆菌 Lactobacillus delbrueckii SZ01, CCTCC NO:M2014268。
2.利用权利要求1所述的德式乳酸杆菌发酵生产L-乳酸的方法,具体步骤如下:
1)、德式乳杆菌SZ01的活化:将德式乳杆菌SZ01置于LB的培养平板上,于50-55℃条件下培养6-8 h,活化;
所述的LB培养基的配方为:葡萄糖 20 g,酵母粉 5 g,蛋白胨 10 g,氯化钠 5 g,补充蒸馏水至1000 ml;
2)、德式乳杆菌SZ01的种子液培养:将活化的德式乳杆菌SZ01菌株取直径在1 cm左右的菌落分别接种于装有100 ml 的种子培养基的250 ml的三角瓶中,于150 r/min, 55℃条件下震荡培养8-10 h,检测摇瓶内pH降到4.0-5.0即可认为完成摇瓶种子液的制备;
所述的种子培养液的配方为:水解糖蜜后糖浓度(以葡萄糖计)为130 g/L,硫酸铵 4 g/L,磷酸二铵2 g/L;
3)、德式乳杆菌SZ01的发酵罐种子液培养:发酵种子培养基的装罐量为发酵罐的三分之二,将步骤2)制备的摇瓶种子液按10%的接种量接种到发酵罐中,55℃培养,转速为150 r/min,pH设定为6.8,使用氢氧化钙溶液作为中和剂,进行发酵罐种子液的培养,培养至种子培养基中的葡萄糖含量为初始糖浓度的一半即完成发酵罐种子液的制备;
所述的发酵罐种子液的配方为:水解糖蜜后糖浓度为230 g/L,硫酸铵 150 g/L,磷酸二铵0.5 g/L;
4)、德式乳杆菌SZ01的上罐发酵培养:发酵培养基的装罐量为发酵罐的三分之二,将步骤3)制备的种子液按10%的接种量接种到发酵罐中,55℃培养,转速为150 r/min,pH设定为6.8,使用氢氧化钙溶液作为中和剂,进行发酵培养;
所述发酵培养基的配方为:糖蜜水解后糖浓度(以葡萄糖计)230 g/L,硫酸铵150 g/L,磷酸二铵0.5 g/L;
根据权利要求2所述的方法,其特征在于:水解糖蜜的步骤如下:
糖蜜与水按照体积比为1:1进行混合,用硫酸调节pH为3.5-4.0,并升温至85℃,每隔2小时检测葡萄糖含量,当测量的水解液中葡萄糖数值不再升高即为水解结束,时间为7-8小时。
3.水解结束后,加入絮凝剂絮凝,加入活性炭脱色,过滤即得。
4.权利要求1所述的菌株在发酵生产L-乳酸中的应用。
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