[发明专利]一种黄芪药材的检测方法

说明书

技术领域

本发明属于中药材质量检测领域，具体涉及一种黄芪药材的质量检测方法。

背景技术

黄芪，含有种化学成分，有蔗糖、葡萄糖醛酸、黄芪甲苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、黄芪皂苷Ⅱ、黄芪皂苷Ⅲ、黄芪多糖A、B、C、D，黏液质，多种氨基酸、苦味素、黄芪皂苷、胆碱、叶酸、黄烷化合物及含有硒、硅、锌、钴、铜、钼等多种微量元素。用于补气固表，利尿托毒，排脓，敛疮生肌。黄芪药材在我国已上市多年，临床效果得以广泛肯定。其中的主要成分黄芪甲苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、黄芪皂苷Ⅱ、黄芪皂苷Ⅲ为黄芪的有效成分，现代研究表明其具有广泛的生理活性作用，这些成分的含量与黄芪的解热抗炎功效密切相关，因此所含上述成分的的多少常作为黄芪药材质量控制的重要指标。

近几年黄芪的市场需求量持续增加，野生资源逐年减少，人工栽培发展缓慢，使得黄芪资源蕴藏量和产量都在大幅下降。导致市场上出现了很多伪品，其中不少伪品的农药残留量超标爆表，给黄芪药材的质量、用药的安全性及有效性带来了很大的冲击，已成为制约黄芪系列药材开发的瓶颈。

目前，正品黄芪的有效检测方法是传统的形态特征和理化特性的鉴别方法，具有一定的局限性，不足以从整体上控制黄芪的质量，作为一味临床常用中药，其真伪优劣受其理化指标、农药残留量多等诸多因素的影响，因此有必要建立一种科学的质量检测方法对黄芪的质量进行评价。

发明内容

为此，本发明所要解决的技术问题在于现有技术中黄芪药材检测方法复杂，质量难以调控的问题，进而提供一种准确度高，简单、快速的检测黄芪药材的方法。

为解决上述技术问题，本发明是通过如下技术方案实现的：

本发明提供了一种黄芪药材的检测方法，包括如下有效成分含量的测定步骤以及农药残留量的测定步骤，其中，

A：黄芪甲苷含量的测定包括如下步骤：

(1)精密称取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；

(2)精密称定待测黄芪药材粉末4g，置索氏提取器中，加甲醇40ml，冷浸，再加甲醇适量，加热回流4小时，提取液回收溶剂并浓缩至干，残渣加水10ml，微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次40ml，合并正丁醇液，用氨试液充分洗涤2次，每次40ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水5ml使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱吸附，以水50ml洗脱，弃去水液，再用40％乙醇30ml洗脱，弃去洗脱液，继用70％乙醇80ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液；

(3)按照高效液相色谱法试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积比为32：68的乙腈-水为流动相；蒸发光散射检测器进行检测；

分别精密吸取对照品溶液10μl、20μl，供试品溶液20μl，注入液相色谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算；其中，理论板数以黄芪甲苷峰计算应不低于4000；

B毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量的测定包括如下步骤：

(1)取毛蕊异黄酮葡萄糖苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含50μg的溶液，作为对照品溶液；

(2)精密称定待测黄芪药材粉末1g，精密加入甲醇50ml，称定重量，加热回流4小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25ml，回收溶剂至干，残渣加甲醇溶解并定容至5ml，作为供试品溶液；

(3)按照高效液相色谱法试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动性A，以0.2％甲酸溶液为流动相B，按照如下程序进行梯度洗脱：从0-20min，流动相A：流动相B的体积比由20％：80％→40％：60％；从20-30min，流动相A：流动相B的体积比为40％：60％；控制检测波长为260nm；

分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注人液相色谱仪，测定；理论板数按毛蕊异黄酮葡萄糖苷峰计算应不低于3000；

C：所述农药残留量的测定包括如下步骤：

(1)精密称取三苯基磷酸酯适量，加丙酮制成每1ml含100μg三苯基磷酸酯的溶液，作为内标贮备液；

分别精密量取各农药对照品贮备溶液1ml及所述内标贮备液1ml，加丙酮定容至100ml，作为混合对照品贮备溶液；分别精密量取适量，加乙腈定容制成20-1000ng/ml的不同浓度的溶液，作为混合对照品溶液；