[发明专利]一种甘草药材的检测方法

说明书

技术领域

本发明属于中药材质量检测领域，具体涉及一种甘草药材的质量检测方法。

背景技术

甘草为多年生草本植物甘草(Glycyrrhiza urlensis Fisch.)的根及根茎，性味甘平，归心、肺、脾、胃经，是临床上常用的药材之一，具有“十方九草”的美称。药理研究表明甘草具有补脾益气、润肺止咳、通经脉、利气血、清热解毒、止血祛痰润肺的功效，临床上被广泛地用于治疗胃溃疡和十二指肠溃疡、咽喉肿痛、支气管炎、咳嗽、关节炎、过敏等疾病及用于保肝、降血脂、抗癌、抗干扰素诱生及增强细胞免疫调节等。甘草含有多种化学成分，主要成分有甘草酸、甘草苷等。现代研究表明甘草含有的成分甘草酸和甘草苷是甘草具有补脾益气，清热解毒，祛痰止咳，缓急止痛，调和诸药等多种药理活性。具有广泛的生理活性作用，因此所含甘草酸、甘草苷含量的多少常作为甘草质量控制的重要指标。

近几年甘草的市场需求量持续增加，野生资源逐年减少，人工栽培发展缓慢，使得甘草资源蕴藏量和产量都在大幅下降。导致市场上出现了很多伪品，其中不少伪品的农药残留量超标爆表，给甘草的质量、用药的安全性及有效性带来了很大的冲击，已成为制约甘草系列药材开发的瓶颈。

目前，正品甘草的有效检测方法是传统的形态特征和理化特性的鉴别方法，具有一定的局限性，不足以从整体上控制甘草的质量，作为一味临床常用中药，其真伪优劣受其理化指标、农药残留量多等诸多因素的影响，因此有必要建立一种科学的质量检测方法对甘草的质量进行评价。

发明内容

为此，本发明所要解决的技术问题在于现有技术中甘草检测方法复杂，质量难以调控的问题，进而提供一种准确度高，简单、快速的检测甘草的方法。

为解决上述技术问题，本发明是通过如下技术方案实现的：

本发明提供了一种甘草的检测方法，该方法包括如下甘草酸、甘草苷的含量测定步骤以及农药残留量的测定步骤，其中：

一种甘草的检测方法，其特征在于，该方法包括如下甘草苷有效成分总量的测定步骤以及农药残留量的测定步骤，其中，

A：所述甘草酸、甘草苷总量的测定包括如下步骤：

(1)精密称取甘草苷对照品、甘草酸铵对照品，加70％乙醇分别制成每1ml含甘草苷20μg、甘草酸铵0.2mg的溶液，即为对照品溶液；

(2)精密称取待测甘草药材粉末0.2g，精密加入70％乙醇100ml，称定重量并超声处理，放冷再称定重量，用70％乙醇补足减失的重量，滤过并取续滤液，即得供试品溶液；

(3)按照高效液相色谱法，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.05％的磷酸溶液为流动相B，按照如下程序进行梯度洗脱：从0-8min，流动相A：流动相B的体积比为19％：81％；从8-35min，流动相A：流动相B的体积比由19％：81％→50％：50％；从35-36min，流动相A：流动相B的体积比由50％：50％→100％：0；从36-40min，流动相A：流动相B的体积比由100％：0→19％：81％；检测波长为237nm；

分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定；理论板数按甘草苷峰计算应不低于5000；

B：所述农药残留量的测定包括如下步骤：

(1)精密称取三苯基磷酸酯适量，加丙酮制成每1ml含100μg三苯基磷酸酯的溶液，作为内标贮备液；

分别精密量取各农药对照品贮备溶液1ml及所述内标贮备液1ml，加丙酮定容至100ml，作为混合对照品贮备溶液；分别精密量取适量，加乙腈定容制成20-1000ng/ml的不同浓度的溶液，作为混合对照品溶液；

另取核糖酸内酯适量，加乙腈溶解制成每1ml含20mg核糖酸内酯的溶液，另取山梨醇适量，加水溶解制成每1ml含山梨醇10mg的溶液；分别精密量取上述核糖酸内酯、山梨醇溶液各1ml混匀，加乙腈定容至10ml，作为分析保护剂；

(2)精密称取待测药材细粉10g，并加入氯化钠1g混匀，精密加入丙酮100ml，冰浴超声处理30分钟，离心，将上清液迅速移入装有1g无水硫酸钠的具塞锥形瓶中，放置30分钟；随后精密量取上述溶液60ml减压浓缩至近干，并加入体积比为1：1的环已烷-乙酸乙酯溶液溶解样品并定容至10ml，过滤后取滤液经GPC凝胶渗透色谱净化，以体积比为1：1的环已烷-乙酸乙酯溶液为流动相洗脱，收集洗脱液，移入KD瓶中，减压浓缩至近干；