[发明专利]一种小麦粉中过氧化苯甲酰的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及检测方法，具体地说是涉及一种小麦粉中过氧化苯甲酰的检测方法，该检测方法主要用于小麦粉中过氧化苯甲酰的检测。

背景技术

国家标准GB/T22325-2008中由甲醇提取过氧化苯甲酰，用碘化钾作还原剂还原为苯甲酸，用高效液相色谱检测，检测相对比较繁琐，且碘化钾溶液的颜色对检测器有干扰。

发明内容

本发明的目的就是针对上述缺点，采用甲醇提取小麦粉中过氧化苯甲酰，用硫代硫酸钠还原成苯甲酸，过滤后用高效液相色谱仪测定，以保留时间定性，以外标法定量。经过试验该方法准确可靠，线性关系较好，具有能够操作方便、干扰小、精度高、检测快速的优点。具体方法如下：

1仪器与试剂

高效液相色谱仪(带紫外检测器)，真空过滤器，超声波清洗器

甲醇(色谱纯)，乙酸铵(分析纯)，苯甲酸标准品，硫代硫酸钠(分析纯)

2色谱操作条件

色谱柱：C18反相柱流动相：甲醇-0.02mol/L乙酸铵(20+80v/v)

波长：230nm流速：1.0ml/min

3试验方法

3.1流动相配制

乙酸铵溶液(0.02mol/L)：称取乙酸铵1.54g，用水溶解并稀释至1L。按照甲醇-0.02mol/L乙酸铵(20+80v/v)的比例加入甲醇，混匀后用0.45微米的滤膜真空过滤。

3.2苯甲酸标准溶液的配制

称取0.1000g苯甲酸，用甲醇溶解稀释至100mL

3.3硫代硫酸钠溶液：10％的水溶液(质量分数)

3.4标准曲线的制备

分别吸取0.00、0.30、0.60、0.90、1.20mL苯甲酸标准溶液置于10mL具塞试管中，加入5.0mL甲醇混匀后，静置5min，加入2.0mL硫代硫酸钠溶液，混匀静置10min，加水至10mL，混匀静置，取上层清液，用0.45微米滤头过滤后进样，以苯甲酸浓度为横坐标，相应峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。

3.5样品的测定

称取1g(准确到0.1mg)样品于10mL具塞试管中，加入5.0mL甲醇混匀后，静置5min，加入2.0mL硫代硫酸钠溶液，混匀静置10min，再加入3.0mL水，混匀静置，取上层清液，用0.45微米滤头过滤后进样，根据苯甲酸的出峰面积从工作曲线上查对应苯甲酸的浓度，计算样品中过氧化苯甲酰的含量。

4计算方法

样品中过氧化苯甲酰的含量

X=V×Cm×0.992]]>

式中：

X-样品中过氧化苯甲酰的含量，单位(g/kg)

V-试样提取液体积，单位(mL)

C-从工作曲线上查试样测定液中苯甲酸的浓度，单位(mg/mL)

m-样品质量，单位(g)

0.992-由苯甲酸换算成过氧化苯甲酰的换算系数

5结果讨论

在本方法的色谱条件下测定，苯甲酸的保留时间为5-6分钟之间，出峰时间短，峰形及与其他组分的分离效果较好。经过测定，标样苯甲酸在0-1.2mg/ml范围内呈线性关系。

重复性：在重复性条件下获得的两次独立测量结果的绝对差值不得超过重复性限(r)，小麦粉中过氧化苯甲酰的含量在(0.00～0.20)mg/kg范围：

r＝4.7964+0.0594M

式中：M-两次测量值的平均值，单位毫克每千克(mg/kg)

如果差值超过重复性限，应舍弃试验结果并重新完成两次单个试验的测定。