[发明专利]一种混合标记物质和标记方法及其应用

说明书

本申请是中国专利申请，申请号200910102207.9,申请日：2009年09月03日的分案申请。

技术领域

本发明涉及一种混合标记物质和标记混合标记物质的方法以及其应用，属于免疫领域中所用的标记物质，尤其是快速诊断领域中应用于检测样本中是否含有被分析物质的检测试剂条。

背景技术

快速诊断领域内，用于检测样本中是否含有被分析物质的工具，常常首选检测试剂条。检测试剂条可以包括样本接受区域，标记区域，检测区域和吸收区域。一般来说，可以直观显示检测结果的带颜色颗粒会和特定的抗原或者抗体标记并固定在标记区域上。在检测过程中，这种标记结合物可以和样本中的物质结合(如果有)，然后顺着样本到达检测区域，并和检测区域中的和特定的抗原或者抗体对应的抗体或者抗原结合，并且通过显示是否有颜色来判断样本中是否含有被分析物。

1971年Faulk和Taytor将胶体金引入免疫化学，此后免疫胶体金技术作为一种新的免疫学方法，在生物医学各领域得到了日益广泛的应用。而今，胶体金是一种常用的标记技术，是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术，有其独特的优点。近年已在各种生物学研究中广泛使用。在临床使用的免疫印迹技术几乎都使用其标记。目前在医学检验中的应用主要是免疫层析法(immunochromatogra-phy)和快速免疫金渗滤法(Dot-immuogold filtration assay DIGFA)，用于检测HBsAg、HCG和抗双链DNA抗体等，具有简单、快速、准确和无污染等优点。同样，乳胶标记也具有相类似的功能，不同的是，乳胶和抗原或抗体之间的结合是依靠偶联作用的共价键作用而非静电作用的。

发明内容

本发明涉及一种混合标记物质，包括标记物和被标记物。优选的，标记物包括选自胶体金颗粒，乳胶颗粒，水溶性标记物之中的至少两种。优选的，标记物包括其中两种物质，如胶体金颗粒和乳胶颗粒。其中优选的，这两种标记物可以分别标记被标记物，然后按照比例混合在一起。这种形式的混合标记物，可以在检测中互不干扰，增加样本中被分析物质的结合位点，提高检测的特异性。另外优选的，这两种标记物可以先后标记同一种被标记物，形成胶体金-被标记物-乳胶这样的结合物。这种结合物，可以具有较高的灵敏度，既在弱阳性的情况下可以显示较强的信号，在弱阴性的情况下也可以显示阴性，因此在cut-off值附近具有较好的分辨作用。另外优选的，标记物还可以包括其中另外两种标记物或者三种标记物。

本发明还涉及了一种标记混合标记物质的方法，包括标记物和被标记物的结合。优选的，标记物至少包括选自胶体金颗粒，乳胶颗粒，以及水溶性标记物的两种或者三种。不同的标记物可以和相同的被标记物共同标记，也可以和相同的标记物分别标记再混合，不同的标记物还可以和不同的被标记物分别标记。在具体的优选的实施例中，将胶体金颗粒和被标记物集合在一起形成胶体金-被标记物结合物；乳胶颗粒和被标记物结合在一起形成乳胶-被标记物结合物；最后将这两种结合物混合在一起。在另外一个优选的实施例中，标记混合标记物质的方法包括，将胶体金颗粒和被标记物结合形成胶体金-被标记物结合物；将乳胶颗粒和胶体金-被标记物结合物结合形成胶体金-被标记物-乳胶结合物。另外，本发明还涉及一种检测试剂条，这种检测试剂条上包括如上所述的混合标记物质。

本发明取得的有益效果是：通过混合标记物质在检测试剂条中的应用，可以有效提高检测的灵敏度和特异性。

附图说明

图1是本发明一个实施例标记物和被标记物的结合示意图，其中，●表示一种标记物，表示另一种标记物，表示被标记物。

图2是本发明另一个实施例标记物和被标记物的结合示意图。

图3是本发明一个实施例的实验结果比较图。其中，C表示控制线，T表示测试线。Ⅰ是将胶体金-strep A抗体置于标记垫上得到的结果；Ⅱ是将乳胶-strep A抗体置于标记垫上得到的结果；Ⅲ是将胶体金-strep A抗体和乳胶-strep A抗体共同置于标记垫上得到的结果；Ⅳ是将胶体金-strep A抗体-乳胶置于标记垫上得到的结果。

具体实施方式

下面对混合标记物质涉及的概念或这些所使用的技术术语做进一步的说明。

样本