[发明专利]一种超氧化物歧化酶的提取方法有效
申请号: | 201410357344.8 | 申请日: | 2014-07-24 |
公开(公告)号: | CN104087562B | 公开(公告)日: | 2016-08-24 |
发明(设计)人: | 黄海军;王若林 | 申请(专利权)人: | 北京翰若生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N9/02 | 分类号: | C12N9/02 |
代理公司: | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人: | 吴开磊 |
地址: | 100125 北京市朝阳区*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 超氧化物歧化酶 提取 方法 | ||
技术领域
本发明涉及生物提取技术领域,具体而言,涉及一种超氧化物歧化酶的提取方法。
背景技术
超氧化物歧化酶(SOD,super oxide dismutase)是一种源于生命体的活性物质,能消除生物体在新陈代谢过程中产生的有害物质,具有抗衰老的特殊功效。它在大自然中普遍存在,不仅在需氧代谢细胞中存在,甚至在厌氧细菌中也有发现。SOD是人体内最重要的酶之一,它是一种极其有效的抗氧化剂,能抵御超氧阴离子自由基对细胞的破坏,能有效控制超氧阴离子自由基,保持人体细胞膜处于年青、柔软和健康的状态。但是,SOD也像其它存在于人体内的保护性成分一样,随着年龄的增加而减少,这样就使细胞更易受到氧化剂的攻击,从而引起老化和疾病。
银杏叶中富含SOD,能催化超氧负离子发生歧化反应,是一种具有抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、抗辐射和消炎作用的金属酶,在临床医学、药学等领域得到广泛应用。
目前,银杏叶中SOD采用有机溶剂进行提取,工艺生产过程中需要用到蒸煮、二次浓缩和烘干共计四道耗汽单元操作,整体能源消耗高,工艺生产流程复杂;有机溶剂使用种类和数量较大,有乙醇、正己烷等,容易在终产品中残留,影响产品质量;并且制得的产品成本较高,不利于产品推广与发展。
发明内容
本发明的目的在于提供一种超氧化物歧化酶的提取方法,以解决上述的问题。
在本发明的实施例中提供了一种超氧化物歧化酶的提取方法,包括以下步骤:
(a)、取新鲜叶子,打浆破碎得到叶子浆料;
(b)、所述叶子浆料采用缓冲溶液KH2PO4-K2HPO4浸泡,所述叶子浆料与所述缓冲溶液的质量比为1:6-10,浸泡液pH为7.3-7.8,浸泡温度为45-55℃;
(c)、浸泡36-40h后,将浸泡物离心,得到上清液;
(d)、将所述上清液浓缩,干燥,得到超氧化物歧化酶产品。
优选地,所述新鲜叶子包括甘薯叶、山楂叶、银杏叶、串叶松香草叶、北海道黄杨叶、大叶黄杨叶、金心黄杨叶中的任意一种或多种。
优选地,所述新鲜叶子为新鲜嫩叶。
优选地,在所述步骤(a)中,破碎的粒度大于4目。
优选地,在所述步骤(b)中,所述缓冲溶液KH2PO4-K2HPO4的质量浓度为30%-40%,KH2PO4与K2HPO4的摩尔数比为0.8-1.2:0.8-1.2。
优选地,在所述步骤(b)中,浸泡罐内含有的物质占其体积的1/3-2/3。
优选地,在所述步骤(b)中,浸泡过程中进行搅拌,搅拌速度为25-30转/分钟。
优选地,在所述步骤(c)中,离心速度为3000-3500转/分钟。
优选地,在所述步骤(c)中,所述上清液的浊度小于8NTU。
优选地,在所述步骤(d)中,浓缩的倍数为4-4.5倍,干燥至所述超氧化物歧化酶产品的水分含量为3-4%。
优选地,在所述步骤(d)中,采用四效真空降膜错流蒸发对所述上清液浓缩,采用喷雾干燥进行干燥。
本发明实施例提供的超氧化物歧化酶的提取方法,是将新鲜叶子破碎后浸泡,然后离心得到上清液,对上清液进行浓缩和干燥,得到固态超氧化物歧化酶,整个提取过程简单易行,能耗低,且得到的超氧化物歧化酶无任何有机溶剂,品质高;降低了20-30%的成本。
具体实施方式
下面通过具体的实施例子对本发明做进一步的详细描述。
本发明的实施例中提供了一种超氧化物歧化酶的提取方法,包括以下步骤:
(a)、取新鲜叶子,打浆破碎得到叶子浆料;
(b)、所述叶子浆料采用缓冲溶液KH2PO4-K2HPO4浸泡,所述叶子浆料与所述缓冲溶液的质量比为1:6-10,浸泡液pH为7.3-7.8,浸泡温度为45-55℃;
(c)、浸泡36-40h后,将浸泡物离心,得到上清液;
(d)、将所述上清液浓缩,干燥,得到超氧化物歧化酶产品。
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