[发明专利]人类免疫缺陷病毒抗体检测试剂盒及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种免疫诊断技术，具体地说是一种磁微粒作为载体的人类免疫缺陷病毒抗体检测试剂盒及其制备方法。

背景技术

人类免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus, HIV）是一种感染人类免疫系统细胞的慢病毒，属反转录病毒的一种。普遍认为，人类免疫缺陷病毒的感染导致艾滋病（AIDS, Acquired Immune Deficiency Syndrome，后天免疫缺乏综合症，或译作“爱滋病”），艾滋病是后天性细胞免疫功能出现缺陷而导致严重随机感染及/或继发肿瘤并致命的一种疾病。艾滋病自1981年在美国被识别并发展为全球大流行，至2003年底，已累计导致两千余万人死亡。人类免疫缺陷病毒通常也俗称为“艾滋病病毒”或“艾滋病毒”。

HIV病毒呈球形或卵圆形颗粒，直径100-140nm，是带有包膜的RNA逆转录病毒，在分类上属于逆转录病毒科中的慢病毒亚科。HIV病毒单拷贝基因组RNA长约9.2-9.7Kb。目前发现有HIV-1和HIV-2两型，这两种类型在生物学特性上很相似，它们的基因组有40%-50%的同源性，其中两种病毒的核心蛋白具有高度的交叉反应。HIV有三个主要的结构基因：env、gag、pol，他们分别编码产生不同功能的蛋白质即抗原，抗原会引起机体免疫应答从而产生相应的抗体。

HIV侵入机体后，一般在6周左右产生免疫应答，产生抗体。血清中首先出现HIV前体p55抗体和核心蛋白p24；然后出现外膜蛋白gp120抗体，跨膜糖蛋白gp41抗体，其他的如p66和p32的抗体也陆续出现。经过几个月至几年后，当病毒再次出现在血液中，血清中的p24、p55抗体水平下降，而其他抗体持续存在或水平上升。通过检测这些不同抗体来诊断是否感染HIV。在我国流行的主要是HIV-1型。

爱滋病毒是透过交换体液来传播的，特别是精液和血液。最常见的传染途径是：进行阴道或肛门性交，共用沾污了的针筒，受病毒感染的母亲传播给婴儿。另外，亦有越来越多个案显示，感染了病毒的母亲可经喂母乳而把病毒传给婴儿。

如果不进行治疗，根据HIV不同亚型，感染艾滋病毒后的的净存活时间平均为9至11年，而诊断为AIDS之后，如果在资源受限导致无法治疗的情况下，根据不同的研究表明，平均存活时间在6至19个月之间。而在医疗资源充足的地区，用高效抗逆转录药物(HAART)的作为有效治疗手段治疗HIV感染者和AIDS患者，可以让死亡率减少80%，并能将新诊断出的HIV感染者的寿命延长最少30年。

至今还没有研制成功可以预防艾滋的疫苗，防治艾滋只有早期进行诊断，才能在早期进行治疗并防治病情的进一步恶化，否则将会传染给他人和使自身病情加重、影响身体健康和传给后代。因此有必要开发出一种性能较好的诊断方法，能有效地在早期就将该疾病诊断出来，及时治疗，减少因艾滋带来的健康和财产的损失。

人类免疫缺陷病毒抗体的传统检测方法包括酶联免疫法、胶体金法及化学发光检测法，这些方法虽然具有很多优点，但在检测的灵敏度、特异性、稳定性等方面还有待进一步提高。全自动微粒子化学发光免疫分析是在酶免疫分析基础上结合了高灵敏度的化学发光测定技术和磁性微粒分离技术，与其他方法相比，这种方法有许多独特的优点，首先它用顺磁性微粒作为固相载体，由于颗粒体积小，表面积大，扩大了反应面积，大大提高了检测灵敏度；其次由于使用全自动仪器及配套试剂，使人为因素减至最低，提高了方法的稳定性和结果的重复性，同时也使得批内差异与批间差异都较小。与放射免疫法相比，微粒子化学发光法除具有高灵敏度、高精确度、高可靠性等优点外，还具有如下优点：a.无放射性污染，稳定性好；b.特异性高；c.试剂可随用随取，测定方便迅速，可作为急诊检测项目。根据大量的实验结果以及临床应用资料，从实用性、稳定性、准确性及其发展前景来看，该方法逐渐成为取代放射性免疫分析和酶免疫分析的首选。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服上述现有技术的不足，提供一种具有高灵敏度和特异性，适合于临床人类免疫缺陷病毒的辅助诊断的微粒子化学发光法HIV抗体检测试剂盒及其制备方法。