[发明专利]高效液相色谱-串联质谱测定卷烟主流烟气中甲基丁香酚含量的方法

说明书

技术领域

本发明涉及烟草和化学技术领域，具体为高效液相色谱-串联质谱测定卷烟主流烟气中甲基丁香酚含量的方法。

背景技术

甲基丁香酚又称为丁香酚甲醚，可用于配制依兰型、康乃馨型、紫丁香型等香精，也用作丁香酚和异丁香酚的变调剂，也常常被应用于食用香精和及烟草香精配方中。在卷烟燃烧过程中产生的主流烟气中也会产生该种成分。2001年Hoffmann与其研究者对1991年的有害成分清单进行了修订和补充，将甲基丁香酚列为卷烟烟气的69种有害成分之一，2002年Rodgman和Green对烟气中已报道的有害成分进行了总结，也将甲基丁香酚列为149种卷烟烟气有害成分之一。

关于卷烟主流烟气中酚类化合物的测定主要集中于邻-苯二酚、对-苯二酚、苯酚、邻-甲酚、间-甲酚等几种高度关注的酚类化合物。如中国专利200910066382.7公开了一种测定卷烟主流烟气中邻-苯二酚、对-苯二酚、苯酚、邻-甲酚、间-甲酚等几种主要酚类化合物的方法，该测定方法是利用剑桥滤片捕集卷烟主流烟气中的主要酚类化合物，用乙酸水溶液萃取后过滤，采用二维液相色谱分离系统串联荧光检测器进行检测，测定卷烟主流烟气中这几种酚类化合物的含量。

卷烟在燃烧过程中，发生了蒸馏、干馏、热解、合成、冷凝等多种物理和化学反应，形成大量新生化合物，甲基丁香酚在卷烟主流烟气中的含量采用何种方法进行测定，相关文献报道较少，截至目前，尚未发现国内外有采用高效液相色谱-串联质谱仪测定卷烟主流烟气中甲基丁香酚含量的任何专利和文献报道。而且，烟气成分非常复杂，基质干扰严重，甲基丁香酚在烟气中的含量又较低，已经建立的烟气中酚类化合物的检测方法能否适用于烟气中甲基丁香酚的测定尚未可知。

因此，建立一种能够快速、准确、分离效果好、灵敏度高的卷烟主流烟气中甲基丁香酚含量的检测方法，是烟草行业当前的一项迫切任务，对于研究和评价吸烟与健康问题也具有十分重要和迫切的意义。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种前处理简单、分离效果好、定性准确、样品分析时间短、检测灵敏度高的卷烟主流烟气中甲基丁香酚的高效液相色谱-串联质谱的测定方法。

为解决上述技术问题，本发明采用下述技术方案：

高效液相色谱-串联质谱测定卷烟主流烟气中甲基丁香酚含量的方法，所述方法是利用剑桥滤片捕集卷烟主流烟气中的甲基丁香酚，然后用甲醇萃取滤片，萃取液用高效液相色谱/串联质谱仪进行检测，采用外标法对卷烟主流烟气中甲基丁香酚的含量进行定量分析。进一步地，步骤1)所述的食品添加剂的性状包括浸膏、固态和液态。

进一步地，所述方法包括以下步骤：

1)将待测卷烟在GB/T16447-2004规定的烟草及烟草制品调节和测试的大气环境条件下平衡48h；

2)采用吸烟机于YC/T29-1996标准抽吸条件下抽吸，利用剑桥滤片捕集卷烟主流烟气中的甲基丁香酚，采用40mL的甲醇萃取滤片，得到萃取液；

3)移取0.5～1.0mL的萃取液采用高效液相色谱/质谱仪进行测定：

4)配制0.05μg/mL～2μg/mL的甲基丁香酚系列标准工作溶液，浓度梯度5个以上且均匀分布；利用高效液相色谱-串联质谱仪对标准溶液进行检测，将得到的甲基丁香酚峰面积作为纵坐标，甲基丁香酚浓度作为横坐标，绘制标准曲线并得到回归方程，然后在相同条件下对样品进行检测，将得到的甲基丁香酚峰面积代入回归方程中，即可计算得出甲基丁香酚的含量。

进一步地，所述高效液相色谱仪条件为：C18反相柱，检测温度30℃，进样量1μL～10μL，流速0.2～0.4mL/min，甲醇和水作为流动相进行梯度洗脱；所述质谱仪条件为：离子化模式为大气压化学电离；扫描模式为正离子；雾化气25～35psi；气帘气20psi；辅助加热气20～30psi；碰撞气5psi；离子源喷射电压4000～5000V；离子源温度350～450℃。

进一步地，所述高效液相色谱仪条件为：C18反相柱，检测温度30℃，进样量1μL，流速0.2mL/min，甲醇和水作为流动相进行梯度洗脱；所述质谱仪条件为：离子化模式为大气压化学电离；扫描模式为正离子；雾化气25psi；气帘气20psi；辅助加热气30psi；碰撞气5psi；离子源喷射电压4500V；离子源温度400℃。

进一步地，所述高效液相色谱仪流动相梯度洗脱程序为：