[发明专利]双咪唑丹磺酰衍生物阳离子型荧光探针及其合成方法和应用

权利要求书

1.一种双咪唑丹磺酰衍生物阳离子型荧光探针，其特征在于该荧光探针的结构式如下所示：

2.一种权利要求1的双咪唑丹磺酰衍生物阳离子型荧光探针的合成方法，其特征在于它由下述步骤组成：

(1)合成两端叔丁氧羰基保护的二乙烯三胺

以N，N-二甲基甲酰胺为溶剂，将二乙烯三胺与叔丁基苯基碳酸酯、三乙胺按摩尔比为3.2～5:8～12:1，在氮气保护、冰浴条件下搅拌12～24小时，分离纯化产物，得到式Ⅰ所示的两端叔丁氧羰基保护的二乙烯三胺；

(2)合成两端叔丁氧羰基保护的二乙烯三胺丹磺酰衍生物

以三氯甲烷为溶剂，将两端叔丁氧羰基保护的二乙烯三胺、丹磺酰氯、三乙胺按摩尔比为1～1.5:1:2～3.5，在氮气保护、常温条件下搅拌12～36小时，所得反应液用饱和食盐水洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥，蒸除三氯甲烷，依次用正己烷与乙酸乙酯的体积比为5～8:1的混合物、正己烷与乙酸乙酯的体积比为1:1的混合物、二氯甲烷和甲醇的体积比为50～60:1的混合物作为洗脱液柱层析纯化产物，真空干燥，得到式Ⅱ所示的两端叔丁氧羰基保护的二乙烯三胺丹磺酰衍生物；

(3)合成两端氨基的二乙烯三胺丹磺酰衍生物

以二氯甲烷为溶剂，将两端叔丁氧羰基保护的二乙烯三胺丹磺酰衍生物、三氟醋酸按摩尔比为1:80～90，在氮气保护、冰浴条件下搅拌12～24小时，蒸除二氯甲烷，加入蒸馏水溶解，然后用饱和碳酸钠水溶液调节pH至9～11，用三氯甲烷萃取，有机层用无水硫酸钠干燥，蒸除三氯甲烷，真空干燥，得到式Ⅲ所示的两端氨基的二乙烯三胺丹磺酰衍生物；

(4)合成两端溴的二乙烯三胺丹磺酰衍生物

以三氯甲烷为溶剂，将两端氨基的二乙烯三胺丹磺酰衍生物、溴乙酰溴、三乙胺按摩尔比为1:2.5～4:25～27，在氮气保护、冰浴条件下搅拌36～48小时，所得反应液用去离子水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，蒸除三氯甲烷，用石油醚与乙酸乙酯的体积比为1:3～5的混合液作为洗脱柱层析纯化产物，真空干燥，得到式Ⅳ所示的两端溴的二乙烯三胺丹磺酰衍生物；

(5)合成双咪唑丹磺酰衍生物阳离子型荧光探针

以四氢呋喃为溶剂，将两端溴的二乙烯三胺丹磺酰衍生物、N-甲基咪唑按摩尔比为1:4～6，在氮气保护下加热回流48～72小时，抽滤，所得固体在丙酮中加热回流8～12小时，抽滤，用乙醚淋洗，得到双咪唑丹磺酰衍生物阳离子型荧光探针。

3.根据权利要求2所述的双咪唑丹磺酰衍生物阳离子型荧光探针的合成方法，其特征在于：在合成两端叔丁氧羰基保护的二乙烯三胺丹磺酰衍生物步骤(2)中，所述的两端叔丁氧羰基保护的二乙烯三胺、丹磺酰氯、三乙胺按摩尔比为1～1.3:1:2.5～3。

4.根据权利要求2所述的双咪唑丹磺酰衍生物阳离子型荧光探针的合成方法，其特征在于：在合成两端溴的二乙烯三胺丹磺酰衍生物步骤(4)中，所述的两端氨基的二乙烯三胺丹磺酰衍生物、溴乙酰溴、三乙胺按摩尔比为1:3～3.5:25～27。

5.根据权利要求2所述的双咪唑丹磺酰衍生物阳离子型荧光探针的合成方法，其特征在于：在合成双咪唑丹磺酰衍生物阳离子型荧光探针步骤(5)中，所述的两端溴的二乙烯三胺丹磺酰衍生物、N-甲基咪唑按摩尔比为1:4～5。

6.权利要求1的双咪唑丹磺酰衍生物阳离子型荧光探针在检测氨基酸中的用途，所述的氨基酸为天冬氨酸或谷氨酸。