[发明专利]p110δ及其抗体在特异性标记滋养层巨细胞（pTGC）中的应用

说明书

技术领域

 本发明属于细胞检测标记技术领域。更具体地，涉及p110δ及其抗体在特异性标记滋养层巨细胞（pTGC）中的应用。

背景技术

胎盘是哺乳动物妊娠期间由胚胎的胚膜和母体子宫内膜联合长成的母子间交换物质的过渡性器官。对于在子宫中发育的胎儿来说，胎盘具有供给、代谢、排泄、分泌和免疫等功能，胎盘异常则会引起胎儿缺氧、窘迫、营养不良、发育迟缓、智力受损、甚至胎死腹中等现象。

    滋养层细胞中的滋养层巨细胞（Parietal TGC，pTGC）为一类线性排列在植入位点及顶叶卵黄囊外侧的多核巨型细胞，根据其分化形成的不同，分为初级与次级（1°与2°），pTGC在胎盘形成与功能维持中的变化与胎盘异常的发生有密切联系。pTGC的侵入是胎盘形成中一个非常关键的过程，且受着严格的时空调控（Cross et al.,1994）。在人类，滋养层侵入不足或过度侵入都会引起妊娠的异常，导致病理性妊娠，比如先兆子痫或绒毛膜癌（Karmakar et al., 2004）。因此，pTGC的监测和标记对于胚胎以及妊娠过程的监测具有非常重要的意义。

目前，pTGC的标记方法的研究主要集中在原位杂交（in situ hybridization，ISH）检测法，相关特异性指标有Pl1、Pl2与 Plf（Simmons DG et al., Dev Biol, 2007）。ISH是利用核酸分子单链之间有互补的碱基序列，将有放射性或非放射性的外源核酸（即探针）与组织、细胞或染色体上待测DNA或RNA互补配对，结合成专一的核酸杂交分子，经一定的检测手段将待测核酸在组织、细胞或染色体上的位置显示出来。ISH是一项可以特异的检测目的基因表达的实验技术，但是要想检测到特定的基因表达，必须具备以下条件：（1）必须专门设计的已知核酸序列的核酸片段-探针；（2）简单而又可靠的探针标记方法；（3）敏感性高且特异性强的检测方法。不仅如此，无论自探针设计、制备还是后期实验中，ISH都体现诸多不便，操作步骤繁多，耗时长达三天，虽有试剂盒的出产以提高实验成功率和便利度，但相比免疫组化（IHC）等实体结构定位标记方法，ISH的“亲民度”仍不高。但是，免疫组化方法需要合适的标记抗体，才能保证标记的特异性和标记效果，因此标记靶标及其抗体的选择对免疫组化结果是至关重要的。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有滋养层巨细胞（pTGC）的标记技术缺陷和不足，提供一种准确性好、特异性强、适用性广的pTGC早期标记物p110delta（p110δ）。

本发明的目的是提供p110δ及其抗体在特异性标记滋养层巨细胞（pTGC）中的应用。

本发明上述目的通过以下技术方案实现：

本发明提供了p110δ在特异性标记早期滋养层巨细胞中的应用。

所述应用是指p110δ在制备滋养层巨细胞的特异性标记物中的应用。

所述p110δ为p110δ的片段，氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

本发明还提供了p110δ抗体作为滋养层巨细胞的特异性标记物的应用，所述p110δ抗体是以SEQ ID NO.1所示序列为抗原获得的抗体。

优选地，所述p110δ抗体是以SEQ ID NO.1所示的 p110δ片段为抗原获得。

所述应用的方法为：以p110δ抗体作为检测标记物，利用免疫组化、免疫荧光或PCR的方法，对滋养层巨细胞进行特异性标记。

优选地，上述滋养层巨细胞是早期的滋养层巨细胞。

SEQ ID NO.1所示序列即人源N端氨基酸363~582，具体如下：