[发明专利]用于检测小麦条锈菌的特异性SCAR标记有效
申请号: | 201410334568.7 | 申请日: | 2014-07-14 |
公开(公告)号: | CN104120125B | 公开(公告)日: | 2017-04-19 |
发明(设计)人: | 高利;陈万权;刘太国;刘博 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院植物保护研究所 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12Q1/68;C12Q1/04;C12R1/645 |
代理公司: | 北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司11129 | 代理人: | 吴泳历 |
地址: | 100193 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 检测 小麦 锈菌 特异性 scar 标记 | ||
1.小麦条锈菌(Puccinia striiformis)的SCAR标记,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
2.用于小麦条锈菌(Puccinia striiformis)检测的SCAR标记引物,其核苷酸序列为:
TF144G:5’-CCTGCGATGGTGTAGACTCA-3’,
TF323G:5’-CGGCGTGTATGTTCGTGTTG-3’,
其特征条带的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
3.一种检测小麦感染条锈菌(Puccinia striiformis)的方法,包括如下步骤:
(1)以待测小麦为材料,提取样品DNA;
(2)以样品DNA为模板,采用权利要求2所述的SCAR标记引物进行PCR反应,得到扩增产物;
(3)琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物,若扩增产物中出现SEQ ID NO:1所示的180bp特征条带,则所述样品DNA中含有小麦条锈菌;若扩增产物不含有SEQ ID NO:1所示的180bp条带,则样品DNA中不含有小麦条锈菌。
4.根据权利要求3所述的方法,所述PCR反应的体系为:20ng/μL模板DNA1μL,10μM引物TF144G1μL,10μM引物TF323G1μL,2×EasyTaq PCR SuperMix12.5μL,ddH2O9.5μL。
5.根据权利要求3或4所述的方法,所述PCR反应的条件为:94℃预变性4min;94℃变性30s、54.5℃退火30s、72℃延伸1min,35个循环;72℃延伸8min。
6.用于检测小麦条锈菌的试剂盒,其特征在于:包括液态的或粉状的用于小麦条锈菌(Puccinia striiformis)检测的SCAR标记引物,其核苷酸序列为:
TF144G:5’-CCTGCGATGGTGTAGACTCA-3’,
TF323G:5’-CGGCGTGTATGTTCGTGTTG-3’。
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