[发明专利]用于检测小麦条锈菌的特异性SCAR标记有效

专利信息
申请号: 201410334568.7 申请日: 2014-07-14
公开(公告)号: CN104120125B 公开(公告)日: 2017-04-19
发明(设计)人: 高利;陈万权;刘太国;刘博 申请(专利权)人: 中国农业科学院植物保护研究所
主分类号: C12N15/11 分类号: C12N15/11;C12Q1/68;C12Q1/04;C12R1/645
代理公司: 北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司11129 代理人: 吴泳历
地址: 100193 *** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 用于 检测 小麦 锈菌 特异性 scar 标记
【权利要求书】:

1.小麦条锈菌(Puccinia striiformis)的SCAR标记,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

2.用于小麦条锈菌(Puccinia striiformis)检测的SCAR标记引物,其核苷酸序列为:

TF144G:5’-CCTGCGATGGTGTAGACTCA-3’,

TF323G:5’-CGGCGTGTATGTTCGTGTTG-3’,

其特征条带的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

3.一种检测小麦感染条锈菌(Puccinia striiformis)的方法,包括如下步骤:

(1)以待测小麦为材料,提取样品DNA;

(2)以样品DNA为模板,采用权利要求2所述的SCAR标记引物进行PCR反应,得到扩增产物;

(3)琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物,若扩增产物中出现SEQ ID NO:1所示的180bp特征条带,则所述样品DNA中含有小麦条锈菌;若扩增产物不含有SEQ ID NO:1所示的180bp条带,则样品DNA中不含有小麦条锈菌。

4.根据权利要求3所述的方法,所述PCR反应的体系为:20ng/μL模板DNA1μL,10μM引物TF144G1μL,10μM引物TF323G1μL,2×EasyTaq PCR SuperMix12.5μL,ddH2O9.5μL。

5.根据权利要求3或4所述的方法,所述PCR反应的条件为:94℃预变性4min;94℃变性30s、54.5℃退火30s、72℃延伸1min,35个循环;72℃延伸8min。

6.用于检测小麦条锈菌的试剂盒,其特征在于:包括液态的或粉状的用于小麦条锈菌(Puccinia striiformis)检测的SCAR标记引物,其核苷酸序列为:

TF144G:5’-CCTGCGATGGTGTAGACTCA-3’,

TF323G:5’-CGGCGTGTATGTTCGTGTTG-3’。

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