[发明专利]液体深层发酵高纯度灵芝菌丝粉的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种健康食品的制备方法，具体涉及液体深层发酵高纯度灵芝菌丝粉的制备方法。

背景技术

灵芝具有良好的药用和保健价值，在中国，它的药用历史已近2000多年。现代研究更是表明灵芝菌丝体中含有多糖、多种氨基酸、活性肽、三萜类、硬脂酸、多种微量元素以及生物碱等多种生物活性物质，其具有抗肿瘤、抗衰老、防辐射、提高免疫力等多种保健价值；且菌丝体有富集作用，能将环境中稀有元素如硒、锗、碘的无机形式转化为有机形式，有利于人体吸收，这更增强了灵芝菌丝体的功效及价值；随着灵芝选育和栽培技术的发展，灵芝制品也日趋多元化。现阶段常见的灵芝相关制品主要有灵芝子实体制品、灵芝孢子粉制品和灵芝菌丝粉制品三种；而灵芝菌丝粉因其采用生物工程技术(液体深层发酵法)进行工业化生产，具有生产周期短，占地少，产量高，品质稳定，且菌丝体中的粗多糖及多糖含量均高于子实体，分别为子实体的2.26倍和3.5倍等特点，使得产品在市场上占有率最高。

灵芝菌丝粉是将优质灵芝菌种深层发酵培养得到的灵芝菌丝液，经浓缩、均质和喷雾干燥后得到的活性灵芝菌丝干燥粉。其主要工艺流程为：斜面菌种→一级摇瓶种子→二级种子罐菌种→发酵罐扩大培养→外循环蒸发器浓缩→浓缩液均质→高速离心喷雾干燥机干燥→灵芝菌丝体干粉→成品。

发明内容

本发明为了解决现有灵芝菌丝固体发酵周期长、易染菌、最终产品品质不稳定、活性成分含量低等问题，而采用液体深层培养的方法来获取一种灵芝菌丝体和灵芝多糖混合液，并且经浓缩、均质、喷雾干燥后形成一种成食用方便、营养全面的灵芝菌丝速溶冲调粉，其方法包括以下步骤：

A：斜面培养基的制备

按照质量百分比葡萄糖6~8%、黄豆粉15~17%、玉米粉10~12%、小麦粉10~13%、磷酸二氢钾0.1~0.3%、硫酸镁0.08~0.12%、琼脂3~5%、蛋白胨3~7%、余为红薯提取液的比例配置，PH调至7.0，分装至试管中，混匀后高温灭菌，灭菌条件：121~123℃，30~40min；灭菌结束10~15min后取出试管，摆成斜面，将斜面培养基转至28~36℃培养箱中恒温培养18~20h，无菌落长出方可取出备用；

B：摇瓶培养基的制备

按照质量百分比葡萄糖6~8%、黄豆粉15~17%、玉米粉10~12%、小麦粉10~13%、磷酸二氢钾0.1~0.3%、硫酸镁0.08~0.12% 、蛋白胨3~7%、余为红薯提取液的比例配置，PH调至6.8~7.2，混匀后高温灭菌，灭菌条件：121~123℃，30~40min，冷却后放入无菌接种室待接种用；

C：种子罐培养基的制备

按照质量百分比葡萄糖1~1.5%、黄豆粉3~5%、玉米粉3~5%、小麦粉2~4%、磷酸二氢钾0.1~0.3%、硫酸镁0.08~0.12% ，加水至100L，然后进行高温灭菌，灭菌条件：121~123℃，30~40min；灭菌结束后，待培养基温度降至27~35℃时，放入无菌接种室待接种用；

 D:发酵罐培养基的制备

按照质量百分比葡萄糖1~1.5%、黄豆粉3~5%、玉米粉3~5%、小麦粉2~4%、磷酸二氢钾0.1~0.3%、硫酸镁0.08~0.12% ，加水至1000L，对反应罐进行加热，温度升至100~105℃时进行一次排气，继续升温至121~123℃时，关闭呼吸器进出口开关，使混合培养基在121~123℃、0.15~0.17MPa环境中灭菌30~40min，灭菌完毕，关闭加热系统使混合培养基降温至25~28℃保温待用放入无菌接种室待接种用；

 红薯提取液的制备步骤包括：将红薯洗净去皮。放到蒸煮锅中用水煮，红薯煮至糜烂，用纱布过滤，取其滤液，即为红薯提取液；

   活化菌种步骤包括：

   （1）选用多孔菌科真菌赤芝，接种到斜面培养基进行培养，培养条件为：26~30℃，2~3天，待斜面菌丝长满，即作为大量生产的母种a；

  （2）选根霉，接种到斜面培养基进行培养，培养条件为：28~30℃，1~2天，待斜面菌丝长满，即作为大量生产的母种b；

  （3）选子囊菌科酵母菌，接种到斜面培养基进行培养，培养条件为：28~30℃，1~2天，待斜面菌丝长满，即作为大量生产的母种c；

  （4）取上述母种a、b、c菌块按质量比1：2：1.5的比例接种至摇瓶培养基，26~30℃培养至菌块长成圆形后置于摇床，恒温28~30℃培养60~70h，至有菌丝球形成后即得液体培养菌种。